人参总皂苷对造血细胞和K562细胞EpoR表达的影响

论文摘要

人参是中医学的“补气生血”要药,人参总皂苷（total saponins of Panax ginseng, TSPG）是其主要药物成分之一。我室既往的研究已表明: TSPG能够促进红系祖细胞（BFU-E,CFU-E）的增殖与分化,促K562等白血病细胞凋亡,抑制其增殖,但其分子机制仍然不清楚。红细胞生成素受体（erythropoietin receptor,EpoR）在造血细胞的增殖分化和K562细胞抗凋亡和向红系细胞分化过程中起着关键的作用,受体与红细胞生成素结合后产生信号转导（STAT5）,最终启动相关基因转录。为了阐述TSPG促进红系血细胞发生和抑制K562细胞增殖的分子生物学机制,本研究以脐血造血细胞和K562细胞为实验对象,在培养体系中加入不同浓度TSPG与之共同培养24h,检测两者EpoR的变化,探讨TSPG对两者的EpoR表达的影响。现将各部分简介如下:1.人参总皂苷对脐血造血细胞EpoR表达的影响:分离脐血单个核细胞,分组后用不同浓度TSPG（0,25,50,75,100mg/l）诱导24h,用流式细胞术,细胞ELISA测定细胞膜表面EpoR数量;细胞浆ELISA测定细胞浆内EpoR数量;用免疫细胞化学染色观察TSPG诱导前和诱导后细胞涂片中表达EpoR的阳性率。结果显示:50mg/l组的细胞膜表面的EpoR较0mg/l对照组显著增多,细胞浆内EpoR数量无变化,TSPG诱导后细胞涂片中表达EpoR的细胞阳性率较诱导前减少。结论:TSPG体外诱导脐血造血细胞能使其细胞膜表面的EpoR数量增加;细胞浆内的EpoR数量未见增多,这可能是人参能促进造血细胞增殖与诱导其向红系细胞分化的机理之一。2.人参总皂苷对K562细胞EpoR表达的影响:体外培养K562细胞,用不同浓度TSPG（0, 50, 100,200,300,500mg/l）诱导24h,用流式细胞术,细胞ELISA,测定细胞膜表面EpoR数量;细胞浆ELISA测定细胞浆内EpoR数量;用激光共聚焦显微镜观察对照组和TSPG诱导组K562细胞免疫荧光图象。结果显示:200mg/l以上组的细胞膜表面的EpoR较0mg/l对照组显著减少,细胞浆内EpoR数量随TSPG浓度增大而增多,TSPG诱导后细胞膜荧光强度较诱导前减弱。结论:TSPG可诱导K562细胞膜上的EpoR转移到细胞浆中,使细胞膜上EpoR数量减少。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分 人参总皂苷对造血细胞红细胞生成素受体表达的影响
• 前言
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 人参总皂苷对K562 细胞EpoR 的表达影响
• 前言
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图
• 文献综述：促红细胞生成素受体在造血细胞上的表达及功能调控
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的发表的论文目录