论文摘要
【目的】探讨人骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外特定的条件下分化成血管内皮细胞的可能性,并比较ATRA(全反式维甲酸)、IGF—1(类胰岛素生长因子)在诱导MSCs体外成内皮细胞过程中的作用。 【方法】经密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法从人骨髓中分离提纯间充质干细胞(MSCs),分别加入两种诱导培养基Ⅰ(M199培养基+10%胎牛血清+100U/ml青霉素+100μg/ml链霉素+VEGF10ng/ml+bFGF5ng/ml+IGF-1 2ng/ml)、A(M199培养基+10%胎牛血清+100U/ml青霉素+100μg/ml链霉素+VEGF10ng/ml+bFGF5ng/ml+ATRA 1μmol/L)中作为实验组I、A;以未添加细胞因子的MSCs作为阴性对照组M;以内皮细胞作为阳性对照组E。分别在光学显微镜下、倒置显微镜下、电镜下观察4组细胞形态和细胞计数;并对4组细胞行Ⅷ因子免疫组化染色、流式细胞术测细胞表面CD34、KDR的表达、RT—PCR法检测培养细胞KDR的表达、Western法检测培养细胞vWF的表达。
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