枯草芽孢杆菌（Bs-208）的半固体发酵研究及其可湿性粉剂的研制

论文摘要

本文以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）208菌株为材料,进行了半固体发酵的研究。在初始发酵配方的基础上,通过正交实验,筛选得到较佳的半固体发酵配方:玉米粉13.7%,麦麸21%,豆饼粉30%,葡萄糖2.1%,K2HPO40.7%,MgSO40.5%,CaCO32%,珍珠岩30%。同时对瓶装、袋装、网盘等三种发酵方法作了比较,并对瓶装发酵方法的条件作了初步研究,结果表明:瓶装发酵产芽孢量较高,其较适发酵条件为每瓶（250ml）装20g物料（以干料计）,加水比例为加水量（ml）:干料（g）=1.1:1.0,发酵温度30℃,消前pH6.5～7.0。将发酵底物加水浸泡后用纱布过滤,滤液离心,离心沉淀经喷雾干燥后,得到Bs原粉。而后对Bs的可湿性粉剂进行研制,经过三轮正交实验,确定了Bs可湿性粉剂所用的助剂及其用量:SDS9.4%,CMC3.4%,硅藻土36.7%,黄原酸胶0.5%,Bs原粉50%。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 1.1 生物农药的应用现状及研究进展
• 1.1.1 国内外现状与发展趋势
• 1.1.2 我国微生物农药产业发展前景
• 1.2 细菌杀（抑）菌剂的研究进展
• 1.2.1 细菌杀（抑）菌剂的开发及产业化现状
• 1.2.2 拮抗细菌的作用机理和筛选
• 1.3 半固体发酵工程研究进展
• 1.4 枯草芽孢杆菌（B.subtilis）的研究进展
• 1.4.1 枯草芽孢杆菌应用现状
• 1.4.2 枯草芽孢杆菌生防机制研究
• 1.4.3 枯草芽孢杆菌发酵培养研究
• 1.4.4 问题及展望
• 1.5 本实验研究的目的和意义
• 2 材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 供试菌株
• 2.1.2 培养基
• 2.1.4 实验仪器
• 2.1.5 制剂化研究用助剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 Bs-208菌株斜面菌种制备
• 2.2.2 Bs-208发酵的活芽孢计数方法
• 2.2.3 Bs-208半固体发酵
• 2.2.4 Bs-208液体发酵
• 2.2.5 半固体发酵培养基的筛选
• 2.2.6 瓶装发酵条件优选
• 2.2.7 半固体发酵生产工艺的初步研究
• 2.2.8 液体发酵产物与半固体发酵产物田间防效的对比
• 2.2.9 Bs-208可湿性粉剂的研制
• 3 结果与分析
• 3.1 半固体发酵培养基配方的优选
• 3.1.1 初始配方最佳加水比例的确定
• 3.1.2 不同氮源对芽孢产量的影响
• 3.1.3 半固体发酵培养基配方的优选
• 3.2 不同半固体发酵方法的芽孢生成量
• 3.3 瓶装发酵条件的优选
• 3.3.1 半固体发酵温度对芽孢生成量的影响
• 3.3.2 装料量对芽孢生成量的影响
• 3.3.3 不同发酵时间段的芽孢生成量
• 3.3.4 消前pH对芽孢生成量的影响
• 3.4 半固体发酵生产工艺的初步研究
• 3.4.1 发酵物浸泡后过滤、离心过程中芽孢的损失
• 3.4.2 絮凝剂对离心过程中收得率的影响
• 3.4.3 不同相对离心力（GRF）对离心得率的影响
• 3.4.4 不同离心时间对收得率的影响
• 3.4.5 半固体发酵Bs-208原粉生产工艺流程简图
• 3.5 半固体和液体深层两种发酵方法产生的Bs的田间防效比较
• 3.5.1 防治番茄叶霉病的田间试验
• 3.5.2 防治草莓灰霉病的田间试验
• 3.6 Bs可湿性粉剂的研制
• 3.6.1 助剂单因子的筛选
• 3.6.2 可湿性粉剂配方的筛选
• 4 讨论
• 4.1 Bs半固体培养基配方优选
• 4.2 半固体发酵条件的优选
• 4.3 不同发酵方法的芽孢生成量
• 4.4 半固体发酵和液体发酵所生成的Bs的田间防病效果比较
• 4.5 可湿性粉剂的研制
• 5 参考文献
• 6 致谢