论文题目: 非编码RNA克隆分析及其功能初步研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生物化学与分子生物学
作者: 付汉江
导师: 孙志贤,郑晓飞
关键词: 衰老,胎肝
文献来源: 中国人民解放军军事医学科学院
发表年度: 2005
论文摘要: 近年来,不编码蛋白质的RNA分子—非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA)被大量发现,与已知的mRNA、rRNA及tRNA不同,它们不直接参与蛋白质的合成。非编码RNA在各种生物中广泛存在,它的种类繁多,主要包括:类mRNARNA、microRNA(miRNA)、snRNA、snoRNA、scRNA、pRNA、SRP-RNA、gRNA等。非编码RNA可影响转录及染色质的结构,参与RNA的加工修饰,调节mRNA的稳定性及翻译,还可以影响蛋白质的稳定和转运。ncRNA以多种机制发挥这些作用,如:RNA-RNA(DNA)碱基配对、RNA-蛋白质相互作用、模拟其他核酸分子或直接起催化作用。microRNA及类mRNA RNA是两类非常重要的非编码RNA分子,已有的研究结果表明它们与细胞的生长和分化、胚胎的发育、肿瘤的形成和抑制都有着密切的关系。本论文对这两种非编码RNA分别在发育、肿瘤及衰老过程中的作用进行了初步研究。 microRNA是一类20-25个碱基可调控其他基因表达的小分子非编码RNA,它广泛存在于各种真核生物中。虽然现在已从多种生物中鉴定出了数百种miRNA,但仍有大量的miRNA尚未发现,即使在人体中,实际存在的miRNA数量也可能远远超过原先预测的约250条。这就意味有许多miRNA,特别是那些在特定组织或在特定发育阶段表达的miRNA有待鉴定。对目前已知的miRNA,只有极少数的功能得到了较完整的研究,大部分miRNA在细胞中所起的作用对我们来说还是一个有待揭示的谜。由于miRNA分子非常小,表达量相对较低,容易降解,因此用传统的方法克隆miRNA比较困难。肝脏是人体的一个及其重要的器官,它承担着造血、免疫、消化、解毒、物质代谢等多种重要功能。为探讨相关miRNA在肝细胞中调控基因表达的机制,揭示相关miRNA在肝细胞增殖、癌变中的生物学功能,我们以人胎肝为实验材料进行了miRNA的克隆分析并初步探讨了miRNA对细胞增殖的影响。这部分获得的主要进展有: 1.建立了一种新的miRNA基因克隆分析方法,与传统克隆方法相比,这种方法减少了RNA操作步骤,具有操作简便、减少RNA降解、无须使用同位素及成功率高等优点。 2.建立了一种简便快速的miRNA表达检测方法,这为检测miRNA在各种组织及细胞中的表达水平,进行功能研究提供了良好的工具。 3.利用这种新的miRNA克隆方法,成功地从人胎肝组织中克隆到27条
论文目录:
目录
缩略语
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人胎肝miRNA基因的克隆分析
实验材料
实验方法
结果
讨论
小结
参考文献
第二部分 一种miRNA检测方法的建立及部分miRNA表达的鉴定
实验材料
实验方法
结果
讨论
小结
参考文献
第三部分 人胎肝miRNA功能的初步研究及miR-483靶基因的预测
实验材料
实验方法
结果
讨论
小结
参考文献
第四部分 小鼠肝脏衰老相关基因的筛选及非编码RNA Mc基因全长的获得
实验材料
实验方法
结果
讨论
小结
参考文献
总结
致谢
附录1 实验设备及仪器
附录2 博士期间发表及待发表的文章、编写书籍及申请专利
附录3 发表及待发表文章全文
发布时间: 2005-09-05
参考文献
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