利用冷闸法接种松材线虫及其相关细菌的试验

论文摘要

本文研究了低温对松材线虫运动的影响,并以此为依据设计了冷闸装置,利用冷闸装置对三年生黑松分别接种野生松材线虫、致病菌荧光假单胞菌GcM5-1A的细菌培养物、非致病菌不解糖消化链球菌AM2B的培养物、荧光假单胞菌GcM5-1A、无菌松材线虫、无菌松材线虫加致病菌荧光假单胞菌GcM5-1A菌株,对松材线虫病的致病机理进行了进一步的研究。此外还研究了苦豆碱对松材线虫运动的影响。主要研究结果如下: 1.研究了低温对松材线虫运动的影响,得出了松材线虫在松枝中不能运动的温度上限,并以此为依据设计了冷闸这一装置,采用物理的方法将松材线虫局限在松树的接种枝上,使其无法运动的到植株的其他部分。 2.利用冷闸法分别接种无菌松材线虫、致病菌荧光假单胞菌GcM5-1、无菌松材线虫加致病菌荧光假单胞菌GcM5-1A,在加装了冷闸装置条件下,接种无菌松材线虫不能导致黑松死亡;接种单独的致病菌也不能导致黑松发病;接种无菌松材线虫加致病菌荧光假单胞菌可导致黑松苗死亡。该试验验证了松材线虫病是线虫和其携带的细菌共同侵染引起的一种植物复合侵染病害。 3.利用冷闸法分别接种荧光假单胞菌GcM5-1A细菌培养的无细胞滤液、非致病菌不解糖消化链球菌AM2B细菌培养的无细胞滤液,致病菌GcM5-1A的无细胞滤液可导致了松树的死亡,而非致病菌AM2B的无细胞滤液不能导致黑松死亡,说明松材线虫携带的产毒细菌可导致松树死亡,不产毒细菌是不能致病的,也解除了对试验方法中是否松树是由于培养基中的或培养过程中产生的毒素引起的死亡的疑问。 4.利用双层培养基法,研究了苦豆碱对松材线虫运动的影响,说明苦豆碱对松材线虫的运动具有很强的抑制作用,阐明了苦豆碱对抗生素的增效作用机理,为松材线虫病复合侵染学说和杀线剂的筛选提供了进一步试验依据。 本论文的创新点: 1.本论文通过研究了低温对松材线虫运动的影响后,设计了冷闸装置,通过将松材线虫控制在植株局部的方法来研究其对整体植株的影响。 2.利用冷闸法的一系列的接种试验证明了松材线虫病是松材线虫和其携带的细菌共同侵染引起的一种植物复合侵染病害。 3.对松材线虫的致病力受到线虫运动性的影响的观点提出了不同的看法。说明松材线虫的致病力强弱与其运动性无必然的关系,应与其携带细菌种类有关。 4.冷闸法做为一种新的试验方法,也适合在野外有菌的环境条件下对大树进行接种试验,能有效地控制松材线虫的运动和接种枝的污染,排除了环境中微生物的干扰,也为解决其他复合侵染型病害提供了新的试验方法。

论文目录

• 第一章 文献综述
• 1. 松材线虫病致病机理的研究现状
• 1.1 酶学说
• 1.2 空穴化学说
• 1.3 有关毒素的研究
• 1.4 松材线虫病病原的研究
• 2. 病原线虫与细菌的复合侵染
• 3. 松材线虫行为学研究进展
• 3.1 松材线虫的侵染行为
• 3.2 运动行为
• 3.3 取食行为
• 3.4 繁殖行为
• 3.5 影响松材线虫繁殖的因素
• 结语
• 第二章 低温对松材线虫运动的影响
• 1. 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2. 结果与分析
• 3. 结论与讨论
• 第三章 利用冷闸法的接种实验
• 1. 利用冷闸法分别接种野生松材线虫、无菌松材线虫、致病菌荧光假单胞菌GcM5-1A、无菌松材线虫加致病菌荧光假单GcM5-1A菌株
• 1.1 材料与方法
• 1.2 试验结果
• 1.3 小结与讨论
• 2. 接种致病菌GcM5-A和非致病菌AM2B无细胞滤液的试验
• 2.1 材料与方法
• 2.2 试验结果
• 2.3 小结与讨论
• 3. 结论与讨论
• 3.1 结论
• 3.2 讨论
• 第四章 苦豆碱对松材线虫运动的影响
• 1. 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2. 结果与分析
• 3. 结论与讨论
• 参考文献
• 附图