雷燕:罗非鱼罗湖病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用论文

雷燕:罗非鱼罗湖病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用论文

本文主要研究内容

作者雷燕,肖洋,赵振峰,唐绍林,黎建斌,陈福艳(2019)在《罗非鱼罗湖病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出:【目的】建立快速检测罗非鱼罗湖病毒(Tilapia Lake Virus,Ti LV)的RT-PCR方法。【方法】参照GenBank中罗非鱼罗湖病毒全基因序列,依据其假定蛋白基因片段3设计合成1对特异性扩增引物,提取罗湖病毒RNA,逆转录成cDNA,进行PCR扩增,通过优化扩增条件和扩增体系,建立快速检测罗非鱼罗湖病毒的RT-PCR方法。用该方法对自然感染罗湖病毒发病的罗非鱼样品进行RT-PCR扩增。【结果】RT-PCR扩增得到与试验设计相符的499 bp的特异性目的条带,而对健康罗非鱼、野生罗非鱼及其他病毒对照组的扩增结果均为阴性。测序比对结果表明,该方法检测结果准确,最低可检测出约10fg/mL的质粒DNA,具有较好的特异性和较高的敏感性。用该方法对332份临床样品进行RT-PCR检测,其中36份样品扩增出特异性的目的条带,经测序比对,检测结果正确。【结论】建立的检测方法可用于TiLV的检测。

Abstract

【mu de 】jian li kuai su jian ce luo fei yu luo hu bing du (Tilapia Lake Virus,Ti LV)de RT-PCRfang fa 。【fang fa 】can zhao GenBankzhong luo fei yu luo hu bing du quan ji yin xu lie ,yi ju ji jia ding dan bai ji yin pian duan 3she ji ge cheng 1dui te yi xing kuo zeng yin wu ,di qu luo hu bing du RNA,ni zhuai lu cheng cDNA,jin hang PCRkuo zeng ,tong guo you hua kuo zeng tiao jian he kuo zeng ti ji ,jian li kuai su jian ce luo fei yu luo hu bing du de RT-PCRfang fa 。yong gai fang fa dui zi ran gan ran luo hu bing du fa bing de luo fei yu yang pin jin hang RT-PCRkuo zeng 。【jie guo 】RT-PCRkuo zeng de dao yu shi yan she ji xiang fu de 499 bpde te yi xing mu de tiao dai ,er dui jian kang luo fei yu 、ye sheng luo fei yu ji ji ta bing du dui zhao zu de kuo zeng jie guo jun wei yin xing 。ce xu bi dui jie guo biao ming ,gai fang fa jian ce jie guo zhun que ,zui di ke jian ce chu yao 10fg/mLde zhi li DNA,ju you jiao hao de te yi xing he jiao gao de min gan xing 。yong gai fang fa dui 332fen lin chuang yang pin jin hang RT-PCRjian ce ,ji zhong 36fen yang pin kuo zeng chu te yi xing de mu de tiao dai ,jing ce xu bi dui ,jian ce jie guo zheng que 。【jie lun 】jian li de jian ce fang fa ke yong yu TiLVde jian ce 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自广东海洋大学学报的雷燕,肖洋,赵振峰,唐绍林,黎建斌,陈福艳,发表于刊物广东海洋大学学报2019年03期论文,是一篇关于罗非鱼论文,罗湖病毒论文,快速检测论文,广东海洋大学学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自广东海洋大学学报2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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