红景天对血管性痴呆大鼠NR1及Bcl-2、Bax蛋白表达和行为学影响的实验研究

红景天对血管性痴呆大鼠NR1及Bcl-2、Bax蛋白表达和行为学影响的实验研究

论文摘要

目的:根据中西医对血管性痴呆的发病机理认识,以及红景天的研究进展,探索红景天改善VD动物模型学习和记忆能力的疗效,阐明部分可能的作用机理,旨在为该药防治VD提供实验依据。方法:1.参照Etsuko Miyamoto、Thomas等文献制备双侧颈总动脉永久结扎前脑缺血致血管性痴呆模型。2.参照文献采用随机数字表将24只老鼠随机分为3组,分别为中药(红景天)组,西药(尼莫地平)组,空白模型组,另设假手术组。3.给药方法:口服灌胃给药,给药剂量为1ml/100g体重。术后连续给药28天,假手术组予等量蒸馏水。4.采用Morris水迷宫实验装置及动态图像采集分析系统进行学习记忆检测,分为定位航行试验、空间搜索试验,由计算机记录各种参数记录。5.HE染色观察脑海马区病理改变;以免疫组化检测大鼠海马CA1区NR1表达、Bcl-2、Bax蛋白表达。6.以分光光度仪检测脑NOS吸光度,计算脑组织NOS活力。结果:1.水迷宫训练的第1天起,模型组比假手术组的逃避潜伏期明显延长(P<0.05),第4—5天差异更明显(P<0.01);而治疗组第2天的逃避潜伏期明显短于模型组(P<0.05),从第4天后两者的成绩差异比较稳定,而且具有显著性(P<0.05)。假手术组同治疗组相比逃避潜伏期差异没有显著性(P>0.05)。同时,4组大鼠随着训练次数的增多,空间记忆能力增强,寻找平台的时间在缩短。2.治疗组大鼠比模型组运动路线的选择及找到平台的效率明显提高,模型组平台停留时间、有效区停留距离较对照组均有不同程度的降低,而且具有显著性(P<0.05)。3.假手术组未见明显病理变化。模型组皮层下、内囊区及海马区结构松散,见较大的软化灶,伴有胶质细胞和小血管增生;灰质内见部分神经元呈缺血性形态改变,胞体缩小,周围出现空晕;海马CA1区的细胞排列紊乱,胞体明显变小,胞核固缩,核仁消失,胞浆致密。治疗组皮质偶见小软化灶,胞体缩小,但形状与正常接近,数量多于模型组;海马CA1区的胞体大小与正常接近。4.模型组NR1表达减弱,与治疗组比较具有显著性(P<0.05);痴呆模型与假手术相比,模型组NOS活性明显增高,具有显著性(P<0.05);模型组与红景天及西药组相比NOS活性增高,有显著性(P<0.05)。5.bcl-2、Bax在假手术组海马CA1区有少量表达。VD模型组阳性细胞着色增强,数量明显增加,其中Bax变化更为显著(P<0.05),bcl-2/Bax的比值较对照组明显降低。治疗组bcl-2、Bax阳性细胞也有增加,着色增深,尤其bcl-2变化显著,bcl-2/Bax的比值较对照组明显增高,而且具有显著性(P<0.05)。结论:1.采用大鼠双侧颈总动脉结扎造成前脑慢性缺血可较好的模拟血管性痴呆,是一种较为理想的VD模型。2.VD模型经给予红景天后,可改善认知水平和病理变化,提高学习记忆能力。3.红景天可降低VD大鼠脑海马区NR1的蛋白表达,减轻EAA毒性,发挥神经保护作用。4.红景天可降低VD大鼠脑组织NOS的活性,减少NO的生成。5.红景天可调节VD大鼠海马Bcl-2及Bax蛋白表达,抑制神经细胞凋亡,保护神经细胞,促进脑功能的恢复。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩略词表
  • 正文
  • 第一章 前言
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验设计与方法
  • 第三章 结果
  • 3.1 一般状况观察:
  • 3.2 水迷宫试验
  • 3.3 血管性痴呆大鼠各组缺血程度形态学比较
  • 3.4 血管性痴呆大鼠海马NR1免疫组化结果
  • 3.5 红景天对血管性痴呆大鼠脑NOS活性的影响
  • 3.6 血管性痴呆大鼠海马Bcl-2、Bax免疫组化结果
  • 第四章 讨论
  • 4.1 双侧颈总动脉结扎致VD模型的评价
  • 4.2 大鼠前脑慢性缺血与认知功能障碍的关系
  • 4.3 红景天对血管性痴呆大鼠海马NR1蛋白表达的研究
  • 4.4 对大鼠血管性痴呆脑NOS活性变化的评价
  • 4.5 血管性痴呆大鼠海马Bcl-2、Bax蛋白表达的研究
  • 第五章 结论
  • 参考文献:
  • 文献综述:中药红景天神经保护作用的研究进展
  • 附录:
  • 1、水迷宫示意图
  • 2、大鼠轨迹图
  • 3、大鼠在平台所在象限游泳距离和平台对侧象限游泳距离对比图
  • 4、HE染色图
  • 5、免疫组化染色图
  • 个人简历
  • 致谢
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