优质北柴胡快速繁殖及主要药用成分分析

论文摘要

柴胡是重要的药用植物,也是我国、韩国及日本等国所使用的大宗药材。《中国药典》（2005年版）收录伞形科植物北柴胡Bupleurum chinese DC.（又称硬苗柴胡）和狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.（又称软苗柴胡或红柴胡）为药用柴胡的原植物。柴胡以根入药,根中含有柴胡皂苷和挥发油等成分,具有抗病毒、抗细菌内毒素、抗炎、抗肿瘤、抗惊厥、解热、降血脂及促进分泌、保肝、提高免疫力等功效,药用价值很高。近年来,柴胡的市场需求量逐年增加,而过度采掘又导致其野生资源越来越少。但是人工种植柴胡存在种子发芽率低、栽培技术难度大等问题。各产地的柴胡均存在不同程度的品种混杂现象,造成了柴胡药材的种质不纯、质量参差不齐,致使总体质量下降,已影响到用药的准确性和药品质量的稳定性,也影响到柴胡的出口创汇。对现有的、已被广大药农所接受的人工栽培种进行种质提纯、复壮,培育出品质优良且变异小的高产、优质柴胡植株并批量生产和供应市场是急需解决的问题。为了建立北柴胡的选优育优技术体系,大量生产北柴胡优质种苗和种子,本研究对种植于山西万荣的中柴1号北柴胡种子进行了种皮损伤和植物激素处理试验,比较了其萌发率;应用植物组织培养技术分别对种植于山西陵川、万荣、左权、芮城、方山、灵丘及甘肃陇西和陕西商洛等8个地区的优质北柴胡进行快速繁殖;应用分光光度法测定了移栽半年后的试管植株根中的柴胡总皂苷含量,应用HPLC-UV法测定了其柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量;用分光光度法测定、比较了试管植株、移栽植株以及移栽田间第2年的试管植株与田间自然栽培植株叶片中叶绿素的含量。实验结果表明:植物激素处理对北柴胡种子萌发无明显作用,打磨损伤处理种皮可使种子的萌发率提高20%,并且能大幅度缩短种子的萌发时间。附加6-BA 1.0mg/L和KT 0.2 mg/L的B5培养基适合于各地北柴胡芽的快速增殖与生长;附加NAA 0.1mg/L、IBA 0.5 mg/L和DSC 1.0 mg/L的1/2 MS培养基对北柴胡试管苗的生根有良好的促进作用;北柴胡试管苗的年繁殖系数超过1×108,移栽成活率达到94%～97%。试管苗移栽大田半年后,根中柴胡皂苷的含量符合质量检测标准。北柴胡试管植株在芽增殖及移栽阶段生长状态良好;移栽育苗钵后试管植株的光合作用能力增强。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 1 综述
• 1.1 我国药用植物资源及研究现状
• 1.2 药用植物生物技术研究现状
• 1.2.1 药用植物快速繁殖
• 1.2.2 药用植物有效成分生产
• 1.2.3 药用植物种质资源保存
• 1.3 柴胡属植物研究现状
• 1.3.1 柴胡属植物的地理分布
• 1.3.2 柴胡种质调查
• 1.3.3 柴胡生长发育规律
• 1.3.4 柴胡生物学特性研究
• 1.3.5 柴胡的化学成分
• 1.3.6 柴胡药理作用与临床应用
• 1.3.7 柴胡质量标准与品质评价的研究
• 2 北柴胡种子萌发条件筛选
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 3 优质北柴胡的快速繁殖
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 北柴胡茎段培养和芽的增殖
• 3.1.3 北柴胡试管苗的生根诱导
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 北柴胡芽增殖培养基的筛选
• 3.2.2 北柴胡试管苗生根培养基的筛选
• 3.3 讨论
• 3.3.1 北柴胡芽的增殖与壮苗
• 3.3.2 北柴胡生根条件的筛选和优化
• 4 北柴胡试管苗的移栽与田间管理
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试管苗的移栽
• 4.1.3 试管苗的田间管理
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 4.3.1 北柴胡试管苗炼苗及移栽
• 4.3.2 北柴胡移栽苗田间管理
• 5 北柴胡移栽试管苗药用成分测定
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 仪器
• 5.1.3 试剂
• 5.2 方法
• 5.2.1 溶液的制备
• 5.2.2 分光光度法测定柴胡总皂苷
• 5.2.3 HPLC-UV法测定柴胡根中柴胡皂苷a，d的含量
• 5.3 结果
• 5.3.1 北柴胡移栽苗根中总皂苷的测定
• 5.3.2 北柴胡移栽苗根中皂苷a，d的含量测定
• 5.4 分析
• 6 北柴胡试管苗与田间苗叶片叶绿素含量测定
• 6.1 材料与方法
• 6.1.1 材料、仪器与试剂
• 6.1.2 方法
• 6.2 结果
• 6.3 分析
• 6.3.1 田间移栽植株叶绿素含量比较
• 6.3.2 试管植株与移栽育苗钵植株叶绿素含量比较
• 6.3.3 移栽育苗钵植株与移栽田间植株叶绿素含量比较
• 6.3.4 同一生长环境下不同类型植株之间叶绿素含量比较
• 6.3.5 移栽育苗钵的不同类型试管植株叶绿素含量比较
• 6.4 结论
• 参考文献
• 图版说明
• 图版Ⅰ
• 图版Ⅱ
• 致谢
• 个人简历