论文摘要
目的：筛选能直接发酵葡萄糖生产海藻糖的高产微生物菌株，并对筛选获得菌株进行摇瓶发酵条件的优化试验，从而建立海藻糖发酵新工艺。 方法：首先在以海藻糖为唯一碳源的培养基上，初筛具有较强海藻糖分解能力的微生物菌株，然后以葡萄糖为唯一碳源进行摇瓶发酵试验，以薄层层析（TLC）检测发酵液成分，直接筛选出具有较高海藻糖产生能力的菌株。对该菌株进行包括培养基组成、发酵温度、起始pH、装液量、接种量、发酵时间等方面的发酵优化试验，建立海藻糖发酵工艺，并提取制备海藻糖结晶样品，进行该样品与海藻糖标准品的红外光谱比对。 结果：本实验室保藏菌株短杆菌Brevibacterium sp．SY361具有直接发酵葡萄糖产生海藻糖的活性。经摇瓶发酵优化试验可知，海藻糖发酵的优化发酵培养基为：3％葡萄糖，0.9％玉米浆，0.5％KH2PO4，0.4％MgSO4·7H2O；发酵起始pH6.0；500ml三角瓶中装液量为80ml；接种量为4.0％；发酵温度30℃；200rpm震荡培养60h。在此条件下，海藻糖产量可达10mg／ml以上，最高为12.2mg／ml。提取制备通过此工艺发酵产生的海藻糖晶体，其红外光谱与海藻糖标准品完全一致。 结论：本实验室保藏菌株Brevibacterium sp．SY361能够发酵葡萄糖，并在发酵液中积累较多的海藻糖，是一株新发现的海藻糖高产菌株，可应用于海藻糖的生产，具有潜在的应用价值。