喜树碱衍生物CPT8体内药代动力学和组织分布

论文摘要

由于喜树碱自身的溶解性较差,毒性较高,本论文为了增强喜树碱衍生物水溶性,提高在血浆中的稳定性以及其抗肿瘤活性,根据CPT构效关系的研究,在喜树碱10位上对其进行结构修饰有助于增强抗癌活性,提高水溶性,降低毒性。结构修饰主要利用10-羟基喜树碱母核上的亲核基团,在碱性条件下与吡啶发生亲核取代反应。通过对体外活性评价,CPT8抑制Topol的活性,并且可以抑制多种肿瘤细胞的生长。在体内抗肿瘤试验中,CPT8对小鼠S180肿瘤细胞有抑制作用。本论文主要研究和探讨喜树碱衍生物CPT8在体内药物代谢动力学和组织分布,通过使用高效液相色谱和高效液相质谱法联用的技术来分析CPT8在老鼠体内的浓度的变化。在碳酸钾的催化作用下,10-羟基喜树碱母核上的亲核基团可以与吡啶发生亲核取代反应,合成化合物CPT8,并采用1ⅡNMR、IR及质谱方法确认及结构。建立了LC-MS-MS方法来检测CPT8在血浆中的药物浓度的含量。即CPT8和内标的保留时间分别是2.63min和3.06min。在血浆中的校正曲线范围是2.5-2500ng/mL （r2>0.993）。LLOQ为2.5ng/mL,精密度<20%。萃取回收率的范围是91.23%-105.36%。日间日内精密度（相对标准偏差）范围分别是0.21%和7.25%。经过反复的冻融,精确度的稳定性的范围是84.12%-108.15%。药物代谢动力学实验结果表明单剂量口服给药50mg/kg,血浆的浓度曲线下面积（AUC0→t和AUCo0→∞）分别是181.76μg min/ml和189.03μg min/ml。半衰期（t1/2）大约在109.29min,清除率是264.506L/kg/min。同时建立了LC-MS-MS方法来检测大鼠口服给药后CPT8在各组织中药物浓度变化。该分析方法的线性、精确度和精密度、回收率和基质效应、稳定性均良好。体内组织分布结果表明口服给药CPT8（50mg/kg）,给药30min后,CPT8主要分布在小肠。在给药180min时,在小肠,血浆,心,肾,脾,肝,肺组织中还能检测到药物的浓度。到720min时,药物逐渐的减少。通过计算得到CPT8在不同组织中的AUC值,结果明显看出药物CPT8主要在肺和心中的AUC值明显大于其它组织,意味着CPT8在临床中对肺癌的治疗起到作用。本论文通过口服给药方式,考查CPT8在老鼠体内药代动力学参数和在组织分布中药物浓度含量的一个测定。以上结果表明CPT8为进一步研究新药开发提供了很好的依据,并且为临床实验打下基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 喜树碱概述
• 1.2 喜树碱的理化性质
• 1.3 喜树碱抗肿瘤活性作用机制
• 1.3.1 拓扑异构酶Ⅰ
• 1.3.2 喜树碱对Topo Ⅰ的抑制机理
• 1.4 喜树碱的构效关系研究
• 1.5 喜树碱衍生物的研究进展
• 1.6 药物代谢研究在新药研发中的作用
• 1.6.1 药物代谢动力学和药物代谢在新药设计中的作用
• 1.6.2 药物代谢与药物的毒性评价
• 1.6.3 药物代谢研究与药物的代谢相互作用
• 1.7 液相色谱串联质谱法在药代动力学中的应用
• 1.8 立题依据
• 2 CPT8的合成与鉴定
• 2.1 实验仪器与材料
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 CPT8的合成
• 2.2.2 CPT8的结构鉴定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 化合物波谱分析
• 2.4 本章小结
• 3 CPT8在大鼠体内的药物代谢动力学
• 3.1 材料
• 3.1.1 药物与试剂
• 3.1.2 实验动物
• 3.1.3 主要仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 制备标准品和质量控制样品
• 3.2.2 配制分析样品
• 3.2.3 质谱方法
• 3.2.4 方法学的确认
• 3.2.5 药物代谢动力学实验设计
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 质谱行为
• 3.3.2 方法学的确认
• 3.3.3 体内药物代谢动力学的分析
• 3.4 本章小结
• 4 CPT8在大鼠体内中的组织分布研究
• 4.1 材料
• 4.1.1 药物与试剂
• 4.1.2 实验动物
• 4.1.3 主要仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 生物样品的配置
• 4.2.2 给药方式与组织样品的采集
• 4.2.3 样品的预处理
• 4.3 方法学的确认
• 4.3.1 标准曲线与线性范围
• 4.3.2 精确度和精密度
• 4.3.3 回收率和基质效应
• 4.3.4 稳定性
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 分析方法的确立
• 4.4.2 组织分布研究
• 4.5 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢