论文摘要
[目的]视神经损伤后难以再生,至今尚未找到促进损伤视神经完全修复的方法。近来研究证明,嗅鞘细胞及睫状神经营养因子均可有效促进损伤神经修复再生。本研究首次将尚处于实验阶段的嗅鞘细胞移植术和已进入临床应用的睫状神经营养因子(CNTF)玻璃体内注射联合应用,以期达到更理想的治疗视神经损伤的效果,为临床救治视神经乃至中枢神经损伤提供新思路及实验依据。[方法]本研究应用我校神经生物学教研室的OECs原代培养技术,体外培养纯化OECs。然后建立成年SD大鼠视神经吸断伤模型:本实验采取经眶上缘暴露视神经的方法制作视神经吸断伤模型,将体外培养纯化的OECs植入球后视神经鞘膜下视神经轴突的吸断处,同时玻璃体内注射CNTF。按治疗手段不同,将实验大鼠分为对照组、CNTF组、OECs组和OECs+CNTF联合应用组。术后4w,采用霍乱毒素B亚单位(choleratoxin B,CTB)顺行示踪技术及荧光金(fluorogold,FG)、生物素化葡聚糖胺(diopinylated dextan amine,BDA)逆行示踪技术评价OECs和CNTF对视网膜神经节细胞存活和视神经轴突再生的影响。通过计算视网膜上相同视野下视网膜神经节细胞即神经元的存活数、神经元的突起长度和密度进行方差分析和多元线性回归分析,评价OECs和CNTF对视网膜神经节细胞及其轴突的逆行性保护作用,比较OECs、CNTF单独应用及联合应用对损伤视神经修复再生的影响,验证二者的协同作用。[结果]一、成功进行OECs体外原代培养和纯化应用原代培养技术,并用差速贴壁、阿糖胞苷抑制和Forskolin.SPE营养物处理,从2.5月成年大鼠的嗅球分离、培养和纯化OECs。根据p75 NGFR免疫细胞荧光染色及Hoechst细胞核标记染色分析了所得细胞的纯度并对不同培养时期的细胞活性进行比较。成年大鼠来源的OECs纯化周期为10d,所得纯度可达95%以上,纯化后12-14d左右细胞活力开始下降。成年大鼠来源的OECs所得纯度较高,有利于进一步研究。二、OECs和CNTF对大鼠视神经损伤后神经元的保护作用建立成年SD大鼠视神经吸断伤模型,将体外培养纯化的OECs植入视神经吸断处鞘膜下,同时玻璃体注射CNTF。按治疗手段不同,将实验大鼠分为对照组、CNTF组、OECs组和OECs+CNTF联合应用组。4w后,通过计算视网膜上相应象限视网膜神经节细胞即神经元的存活数、神经元的突起长度和密度进行方差分析和线性回归分析,评价OECs和CNTF对视网膜神经节细胞及其轴突的逆行性保护作用。与正常眼大鼠视网膜神经节细胞数量相比,对照组损伤眼神经元明显减少。各治疗组视网膜神经节细胞存活数明显多于对照组,且神经元轴突长度及密度也均大于对照组。OECs组的视网膜神经节细胞存活数高于CNTF组,证明OECs保护视神经元作用强于CNTF。三、OECs和CNTF在视神经损伤修复过程中具有协同作用在观测、统计上述各视神经损伤指标时发现,与CNTF或OECs单用组相比,CNTF和OECs联合应用组对视神经损伤的修复作用最强。提示CNTF和OECs在视神经损伤修复治疗中具有协同作用。[结论]局部应用外源性OECs和玻璃体注射CNTF均能减轻视神经损伤引起的逆行性神经元损害,OECs保护视神经元的作用优于CNTF。OECs与CNTF联合应用保护视神经元效果更加显著,两者合用产生了协同作用。
论文目录
相关论文文献
- [1].视神经剪断联合睫状血管结扎术治疗绝对期青光眼19例的临床分析[J]. 岭南急诊医学杂志 2017(01)
- [2].急性视神经炎后视神经功能与视觉诱发电位的研究(英文)[J]. 国际眼科杂志 2017(05)
- [3].视神经脊髓炎患者41例视神经磁共振分析[J]. 第二军医大学学报 2009(08)
- [4].视神经蛋白在自噬中作用研究进展[J]. 中华实用诊断与治疗杂志 2017(06)
- [5].复方樟柳碱眼部注射治疗缺血性视神经病的疗效观察与护理[J]. 当代护士(下旬刊) 2014(02)
- [6].人视神经的解剖学数值及意义[J]. 解剖科学进展 2013(03)
- [7].视神经转移瘤一例报道并文献复习[J]. 海南医学 2010(05)
- [8].兔眶内视神经慢性损伤动物模型的建立[J]. 眼科新进展 2008(06)
- [9].视神经剪断术治疗绝对期青光眼21例疗效总结[J]. 江西医药 2008(06)
- [10].眼视神经切断再生实验研究[J]. 武警医学院学报 2008(01)
- [11].视神经切断再生实验研究[J]. 国际眼科杂志 2008(09)
- [12].萎缩的视神经能再生吗[J]. 老友 2011(09)
- [13].抑制某种酶修复小鼠受损视神经[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版) 2011(02)
- [14].干细胞与视神经保护及其损伤修复(英文)[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2010(23)
- [15].大鼠视神经部分切断模型的建立和重复性评价[J]. 眼科 2013(01)
- [16].大鼠视神经钳夹伤模型的建立及磁共振成像运用初探[J]. 眼科新进展 2014(03)
- [17].复发型视神经脊髓炎与复发型多发性硬化患者视神经改变的磁共振对照研究[J]. 华西医学 2009(02)
- [18].视神经脊髓炎患者的护理体会47例[J]. 中国社区医师 2020(11)
- [19].适形调强放疗对鼻咽癌患者视神经功能影响的剂量分析和临床初步结果[J]. 中国神经肿瘤杂志 2011(03)
- [20].老鼠视神经再生机制[J]. 技术与市场 2010(09)
- [21].癌钙调蛋白在炎症反应促视神经再生作用中的研究进展[J]. 国际眼科杂志 2017(07)
- [22].视神经蛋白突变在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展[J]. 解剖学报 2016(03)
- [23].浅谈视神经萎缩的病因与防治[J]. 中国眼镜科技杂志 2008(11)
- [24].眼球脱臼伴外伤性视神经离断1例[J]. 国际眼科杂志 2009(05)
- [25].视神经慢性受压后视神经胶质细胞的病理变化[J]. 第二军医大学学报 2009(06)
- [26].复方樟柳碱辅助治疗前部缺血性视神经病变的观察及护理[J]. 当代护士(专科版) 2009(07)
- [27].视神经与同侧额叶白质信号强度比值对急性视神经炎诊断价值的研究[J]. 国际医学放射学杂志 2016(05)
- [28].神经眼科中的眼底病和视神经病[J]. 中国临床神经科学 2012(02)
- [29].青光眼视神经保护性治疗的进展[J]. 实用防盲技术 2010(03)
- [30].不同给药途径的聚乙二醇对大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞存活的影响[J]. 神经解剖学杂志 2012(02)
标签:视神经损伤论文; 嗅鞘细胞论文; 移植论文; 睫状神经营养因子论文; 视网膜神经节细胞论文; 细胞存活论文;