海蛇药效部位的物质基础研究

海蛇药效部位的物质基础研究

论文摘要

青环海蛇Hydrophis cyanocinctus和平颏海蛇Lapemis hardwickii作为我国海蛇的主要品种,被民间所习用,用于治疗风湿痹症、四肢麻木、关节疼痛、疥癣恶疮、体虚和小儿营养不良等症。目前国内外关于海蛇的研究主要集中在蛇毒部分,对其他成分的研究较少。为了寻找与功效相关的化学成分,我们首次结合药效学对海蛇活性部位进行研究。海蛇用50%乙醇提取2次,滤液合并、过滤、减压浓缩后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。我们采用碳廓清率试验法和免疫器官重量测定法,对海蛇4个不同提取部位进行了小鼠免疫活性筛选,确定乙酸乙酯提取部位为活性部位。通过各种色谱分离手段,从乙酸乙酯部位分离得到6个化合物。利用理化性质和波谱学方法,对其中的5个化合物进行了结构鉴定。分别为SS-1(胆甾醇)SS-2(1-甲基海因)、SS-3(神经酰胺化合物)、SS-4(对羟基苯乙酸)、SS-5(对羟基苯乙酸甲酯)。其中SS-2、SS-4、SS-5为首次从海蛇中分离得到,且SS-2为首次从海洋生物中分得。查阅文献资料,SS-3可能为一新的神经酰胺化合物,其结构在进一步的确定过程中。现代研究表明,1-甲基海因具有广泛的生理活性,主要表现为抗炎、镇咳、抗低血清蛋白血症、消除活性氧和自由基、抗疲劳等方面,其对免疫系统的影响与药效实验吻合。胆甾醇的含量很大,且具有一定的生理作用。故我们分别采用HPLC和TLCS建立2个成分的含量测定方法,药材中1-甲基海因和胆甾醇的平均含量分别为0.109%和0.222%,结果表明方法简便快捷、精密度高、准确性好,为药材的质量控制提供了依据。最后采用TLC和SDS-PAGE法,对海蛇和其他海洋动物以及其他蛇类进行定性鉴别和成分的分析比较,为后续的研究做好准备。

论文目录

  • 摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 一. 对海蛇的认识和利用
  • 二. 海蛇开发过程中存在的问题
  • 三. 项目的研究目的与意义
  • 第一部分 文献综述
  • 1.1 蛇类药材的价值和开发
  • 1.2 海蛇的研究进展
  • 第二部分 海蛇活性部位的筛选
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 预实验
  • 2.3 活性部位的筛选
  • 2.4 乙酸乙酯部位不同剂量对小鼠免疫功能的影响
  • 2.5 小节与讨论
  • 第三部分 化学成分研究
  • 3.1 材料与仪器
  • 3.2 乙酸乙酯部位的提取与分离
  • 3.3 纯度检查
  • 3.4 化合物的结构鉴定
  • 第四部分 药材的含量测定
  • 第一节 HPLC法测定海蛇中1-甲基海因的含量
  • 4.1 仪器与试药
  • 4.2 对照品研究
  • 4.3 色谱条件
  • 4.4 实验方法与结果
  • 第二节 TLCS法测定海蛇中胆甾醇的含量
  • 4.5 仪器与试药
  • 4.6 对照品研究
  • 4.7 色谱条件
  • 4.8 薄层扫描条件
  • 4.9 实验方法与结果
  • 第三节 实验小结与讨论
  • 第五部分 海蛇与其他动物药的TLC和SDS-PAGE
  • 5.1 海蛇与其他海洋动物的TLC鉴别
  • 5.2 海蛇与陆地蛇的SDS-PAGE鉴别
  • 第六部分 结论与讨论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附图
  • 附件
  • 相关论文文献

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