疏肝和胃丸对应激大鼠EGF、TGFα含量的影响及EGFR表达的实验研究

疏肝和胃丸对应激大鼠EGF、TGFα含量的影响及EGFR表达的实验研究

论文摘要

目的:探讨临床经验方疏肝和胃丸对应激性消化性溃疡、急慢性胃炎的胃粘膜保护机制。方法:大鼠随机分为四组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、疏肝组(C组)、雷尼替丁组(D组)。C组、D组分别予疏肝和胃九(1.08g/kg·d)、雷尼替丁(0.0015g/kg·d)灌胃7天,进行预保护处理,A组、B组则予相同体积生理盐水灌胃7天,7日后B、C、D组动物按水浸束缚法(WRS)造应激性大鼠胃粘膜损伤模型,然后各组分别检测:①胃粘膜损伤指数(UI);②胃粘膜血流量(GMBF);③胃组织病理学观察;④放免法检测PGE2、PGI2、EGF、TGFα含量;⑤免疫组化法检测EGFR蛋白表达;⑥原位杂交方法检测EGFR基因表达。结果:1.疏肝组、雷尼替丁组与模型组比较均能显著降低UI(P<0.01);疏肝组降低UI的作用强于雷尼替丁组(P<0.05)2.疏肝组、雷尼替丁组与模型组比较均能显著增加GMBF(P<0.01);疏肝组增加GMBF的作用强于雷尼替丁组(P<0.05)。3.疏肝组、雷尼替丁组与模型组比较均能明显改善胃溃疡大鼠胃粘膜的病理损伤;4.疏肝组、雷尼替丁组与模型组比较均能明显提高胃粘膜组织中PGE2和血清中PGI2含量(P<0.01);疏肝组提高胃粘膜组织中PGE2和血清中PGI2含量的作用强于雷尼替丁组(P<0.05)。5.疏肝组、雷尼替丁组与模型组比较均能明显升高血清和胃粘膜组织EGF、TGFα含量(P<0.01);疏肝组提高血清和胃粘膜组织EGF、TGFα含量的作用强于雷尼替丁组(P<0.05)。6.疏肝组、雷尼替丁组与模型组比较均能明显增强EGF、TGFα的共同的受体EGFR蛋白和基因在胃粘膜组织的表达水平(P<0.01);疏肝组增强EGF、TGFα的共同的受体EGFR蛋白和基因在胃粘膜组织的表达水平的作用强于雷尼替丁组(P<0.05)。结论:1.疏肝和胃丸能减低应激性胃粘膜损伤大鼠的胃粘膜损伤指数(UI),对动物胃粘膜具有较好的保护作用。2.疏肝和胃丸能增加胃粘膜GMBF、提高体内PG类、EGF相关肽类物质及EGFR的含量与表达;3.提示疏肝和胃丸保护胃粘膜作用可能是通过促进内源性保护性PG的合成与释放,促进促胃粘膜生长的生长因子合成及其受体的表达,从而达到对抗胃粘膜损伤的作用。

论文目录

  • 中英文缩略词表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 第一部分 疏肝和胃丸对胃粘膜损伤组织形态学及胃粘膜血流量的影响
  • 1 材料和方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 方法
  • 2 结果与分析
  • 2.1 胃粘膜损伤指数(UI)的影响
  • 2.2 胃粘膜微循环血流量的影响
  • 2.3 胃粘膜形态学的影响
  • 3.讨论
  • 3.1 UI和组织形态学的改变
  • 3.2 胃粘膜血流量的改变
  • 2及血清、胃粘膜组织PGE2、EGF和TGF α含量的影响'>第二部分 疏肝和胃丸对大鼠血浆PGI2及血清、胃粘膜组织PGE2、EGF和TGF α含量的影响
  • 1 材料与方法
  • 1.1 动物来源、分组与造模方法
  • 1.2 主要仪器与试剂
  • 1.3 放免检测样品的制备
  • 1.4 放免检测原理
  • 2放免的检测方法'>1.5 PGE2放免的检测方法
  • 1α的检测方法'>1.6 6-酮-前列腺素F的检测方法
  • 1.7 EGF的放免检测方法
  • 1.8 TGF α的放免检测方法
  • 1.9 统计方法
  • 2 结果与分析
  • 2、血浆6-酮-前列腺素F的比较'>2.1 胃粘膜组织PGE2、血浆6-酮-前列腺素F的比较
  • 2.2 胃粘膜组织和血清EGF含量的比较
  • 2.3 胃粘膜组织和血清TGF α含量的比较
  • 3.讨论
  • 2、PGI2的关系'>3.1 疏肝和胃丸的胃粘膜保护作用与PGE2、PGI2的关系
  • 3.2 疏肝和胃丸的胃粘膜保护作用与EGF、TGF α的关系
  • 第三部分 疏肝和胃丸对大鼠胃粘膜组织EGFR蛋白及基因表达的影响
  • 1 材料与方法
  • 1.1 动物来源、分组、造模方法
  • 1.2 主要仪器与试剂
  • 1.3 取材方法
  • 1.4 免疫组化染色测定胃粘膜EGFR蛋白表达
  • 1.5 原位杂交组织化学法测定胃粘膜EGFR基因表达
  • 2 结果与分析
  • 2.1 EGFR免疫组化染色测定结果
  • 2.2 胃粘膜组织内EGFRmRNA表达测定结果
  • 3.讨论
  • 第四部分 讨论
  • 1 动物模型的选择
  • 2.中医对胃粘膜损伤及保护的理论认识
  • 2.1 "胃脘痛"病机与"气"的关系
  • 2.2 中医整体观指导下的情志-肝-胃三者之间的关系
  • 3.疏肝和胃丸胃粘膜保护作用的中医理论基础
  • 3.1 方药组成
  • 3.2 立法选方依据
  • 3.3 现代药理研究
  • 4.疏肝和胃丸胃粘膜保护作用机制
  • 4.1 增加GMBF α是疏肝和胃丸胃粘膜保护机制的中心环节
  • 4.2 提高内源性PG类物质含量是疏肝和胃丸胃粘膜保护的另一作用机制
  • 4.3 提高EGF相关肽类物质及其受体EGFR的含量,是疏肝和胃丸预防急性胃粘膜损伤的重要机制之一
  • 第五部分 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 综述
  • 附录
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