棉酚衍生物的合成及其生物活性研究

论文摘要

本文从棉仁出发提取棉酚，对传统工艺进行了摸索改性，然后对棉酚结构进行改造，运用现代波谱和光谱仪器对其进行结构表征，确定其结构。进一步从醋酸棉酚及其棉酚衍生物与细胞增殖抑制活性、ct-DNA的相互作用以及棉酚衍生物Ⅱ金属配合物水解质粒DNA方面来研究棉酚及其衍生物的生物活性。论文的主要研究结果如下：（1）棉酚提取工艺的研究本文选取了苯胺-丙酮工艺，即将棉仁经有机溶剂浸泡提取棉酚后，加入苯胺生成苯胺棉酚沉淀，在溶剂中用硫酸将苯胺棉酚转化为醋酸棉酚精制而得，用乙醚和丙酮两种溶剂交叉精制，在精制过程中采用了抗氧化处理，这种处理效果较好的解决了棉酚的氧化变性问题，且使得醋酸棉酚的纯度达到预期的标准。（2）醋酸棉酚及其棉酚衍生物与细胞增殖抑制活性研究利用MTT法对醋酸棉酚及棉酚衍生物进行了人慢性髓性白血病细胞（K562细胞）增殖抑制活性的筛选，得到了抑制率优于阳性对照顺铂的棉酚衍生物。棉酚衍生物Ⅱ的IC50是醋酸棉酚的5倍、棉酚衍生物Ⅰ的12倍，棉酚衍生物Ⅲ、Ⅳ的6倍。（3）棉酚及其衍生物与ct-DNA的相互作用研究利用紫外—可见吸收光谱法研究了棉酚的衍生物与ct-DNA的相互作用，实验结果表明，醋酸棉酚及其棉酚衍生物Ⅰ，Ⅱ与ct-DNA形成了1：1的复合物，且与ct-DNA的相互作用是通过嵌入作用方式嵌入DNA的双螺旋之间，其大小顺序是：棉酚衍生物Ⅱ＞棉酚衍生物Ⅰ＞棉酚，棉酚衍生物Ⅲ，Ⅳ与ct-DNA的相互作用较差。（4）棉酚衍生物Ⅱ与金属离子形成的配合物水解质粒DNA的研究通过琼脂糖凝胶电泳的研究发现：棉酚衍生物Ⅱ及其单独的铜离子和锌离子本身并没有切割DNA的活性，在铜离子或锌离子的存在下，棉酚衍生物Ⅱ表现出了对DNA的切割活性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 棉酚及其衍生物的制备和生物活性研究进展
• 1.1 棉酚的存在形态及其物化性质
• 1.2 棉酚的提取方法
• 1.3 棉酚及其衍生物的生物活性
• 1.3.1 棉酚及其衍生物在计划生育方面的应用研究
• 1.3.2 棉酚及其衍生物在医药方面的其它广泛研究
• 1.4 棉酚及其衍生物的应用
• 1.5 研究的科学意义、学术价值、应用前景
• 1.6 实验方案
• 第二章 醋酸棉酚的制备
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料与试剂
• 2.2.2 主要仪器与设备
• 2.2.3 苯胺棉酚的制备原理
• 2.2.4 醋酸棉酚的制备
• 2.3 醋酸棉酚的分析测定
• 2.4 小结
• 第三章 棉酚衍生物的制备及表征
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 试剂
• 3.2.2 仪器
• 3.2.3 实验方法
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 棉酚衍生物 I
• 3.3.2 棉酚衍生物 II
• 3.3.3 棉酚衍生物 III
• 3.3.4 棉酚衍生物 IV
• 3.4 讨论
• 3.5 小结
• 第四章 醋酸棉酚及其棉酚衍生物的细胞增殖抑制活性研究
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 药品及试剂
• 4.2.2 实验仪器
• 4.2.3 溶液配制
• 4.2.4 细胞培养
• 4.2.5 实验方法
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 醋酸棉酚及棉酚衍生物的细胞增殖抑制活性筛选结果
• 50测定结果'>4.3.2 醋酸棉酚及棉酚衍生物的细胞增殖抑制活性 IC₅₀测定结果
• 4.3.3 棉酚衍生物II对 K562 细胞增殖抑制作用的时效关系
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 第五章 棉酚衍生物与 CT-DNA 的相互作用
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 仪器和试剂
• 5.2.2 溶液的配制
• 5.2.3 实验方法
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 棉酚与 ct-DNA 的滴定曲线
• 5.3.2 棉酚衍生物 I 与 ct-DNA 的滴定曲线
• 5.3.3 棉酚衍生物 II 与 ct-DNA 的滴定曲线
• 5.3.4 棉酚衍生物 III 与 ct-DNA 的滴定曲线
• 5.3.5 棉酚衍生物 IV 与 ct-DNA 的滴定曲线
• 5.4 讨论
• 5.5 小结
• 第六章 棉酚衍生物 II 的金属配合物水解质粒 DNA
• 6.1 引言
• 6.2 材料与方法
• 6.2.1 实验仪器
• 6.2.2 实验试剂
• 6.2.3 实验步骤
• 6.3 实验结果与讨论
• 6.4 小结
• 第七章 小结
• 参考文献
• 附图
• 主要符号对照表
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文情况