Akt信号通路在紫绀型先天性心脏病患儿心肌慢性缺氧适应中的作用研究

论文摘要

背景与目的：先天性心脏病（简称先心病）的发病率为612‰，每年大约有15-20万先心病患儿出生[1]。紫绀型先心病是临床常见的先心病类型，心肌慢性缺氧是紫绀型先心病患儿重要的病理生理改变[2]。Akt信号通路对缺血缺氧损伤后心肌细胞的存活起主要调控作用[3]。近年来国内外的学者对Akt信号通路的研究主要集中于人类肿瘤[4-5]，Akt信号通路辅助肿瘤生长，主要通过增强细胞在缺氧环境下的适应能力和对营养供给缺乏的耐受能力,发挥其抑制肿瘤细胞凋亡，促进细胞存活的作用。小儿心肌慢性缺氧适应机制还不是十分清楚，对其信号通路的研究较少， Akt信号通路在其发生发展中的作用尚不明确。为此，本课题以紫绀型先心病患儿作为研究对象，非紫绀型先心病患儿作为病例对照，通过检测蛋白激酶B（总Akt）和磷酸化蛋白激酶B(Ser473P-Akt)在两组患儿心肌组织中的蛋白表达水平和部位，以及其表达与动脉血氧饱和度（SaO2）之间的关系，探讨Akt信号通路在紫绀型先心病患儿心肌慢性缺氧适应中的意义。方法：收集手术治疗的先心病患儿50例，根据术前有无紫绀分为两组，其中紫绀组26例， SaO260%89%；非紫绀组24例，SaO2>95%，所有病例均不伴肺动脉高压（肺动脉压<30mmHg）。心脏外科手术体外循环前留取右心耳组织，应用Western blot技术，检测紫绀型和非紫绀型先心病患儿心肌组织总Akt和Ser473P-Akt蛋白表达水平，将Ser473P-Akt蛋白水平与患儿术前SaO2进行相关性分析。应用免疫组织化学技术，检测紫绀型和非紫绀型先心病患儿心肌组织中总Akt和Ser473P-Akt蛋白表达部位与水平。本课题设计方案经重庆医科大学附属儿童医院伦理委员会批准。结果：本研究主要结果如下：Western blot检测结果显示，与非紫绀组相比，紫绀组患儿心肌组织Ser473P-Akt蛋白表达水平明显增高（p <0.001），而两组患儿总Akt蛋白表达水平差异无统计学意义（p>0.05）;紫绀组患儿心肌组织Ser473P-Akt蛋白表达水平与患儿术前SaO2呈显著的负相关（r=-0.771，P <0.01）。免疫组化检测证实，紫绀组患儿心肌组织Ser473P-Akt蛋白大部分表达在心肌细胞的胞浆，心肌细胞的胞核亦有微弱表达，而非紫绀组心肌细胞则无明显Ser473P-Akt蛋白表达。两组患儿总Akt蛋白绝大部分也表达在心肌细胞的胞浆，心肌细胞的胞核亦有微弱表达，但表达部位和水平无明显差异。结论：Akt信号通路激活可能是紫绀型先心病患儿心肌慢性缺氧适应重要信号调控机制之一。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分：紫绀型先天性心脏病患儿心肌组织总Akt，Ser473P-Akt蛋白表达水平的检测
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二部分：紫绀型先天性心脏病患儿心肌组织总Akt，Ser473P-Akt蛋白表达部位的检测
• 1 材料与方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 全文总结
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间的发表的学术论文目录