油茶组培再生体系建立及愈伤组织诱导

论文摘要

本文以油茶幼嫩带腋芽茎段为外植体,对腋芽诱导、芽苗增殖、壮苗和生根等方面进行了研究,初步建立了油茶植株的完整再生体系。在愈伤组织诱导和分化的研究中,较为系统的探索了油茶叶片、叶柄、茎段三种外植体诱导愈伤组织和愈伤组织再分化的最佳激素组合,以及叶片诱导愈伤组织过程中抑制褐变的较佳处理。主要结果如下：（1）外植体消毒：春季3-5月采集幼嫩枝条作为外植体。启动茎段腋芽萌发实验中,以0.1%升汞消毒8min,腋芽启动率最高,可达64.0%；愈伤组织诱导中,叶片、叶柄、节间茎段分别以2%的次氯酸钠消毒21min.21min.24min效果较好,愈伤组织诱导率可分别高达73.6%、82.6%和67.3%。（2）带腋芽茎段的初代培养：油茶带腋芽茎段的最佳启动培养基为MS+TDZ（0.5mg/L）+NAA（0.5mg/L）,芽启动率可达64.5%,平均芽长为1.6cm。（3）芽苗的增殖培养：芽苗增殖培养基为MS+6-BA（3.0mg/L）+NAA（0.05 mg/L）时,芽增殖倍数可达2.55倍,有效芽率为0.74。（4）壮苗与生根培养：本试验设计的活性炭浓度在壮苗培养没有明显促进作用；1/2MS+NAA（2.0mg/L）+蔗糖（20g/L）能促进有效芽生根形成完整植株。（5）外植体愈伤组织诱导：叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6.BA （2.0mg/L）+2,4-D（0.5mg/L）,诱导率达74.5%；叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA（2.0mg/L）+2,4-D（2.0mg/L）,诱导率达77.8%;茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA（4.Omg/L）+2,4-D（2.0mg/L）,诱导率达67.8%。低温预处理7d,能较好的抑制叶片愈伤组织褐化。（6）愈伤组织增殖分化：愈伤组织在增殖培养基MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA中能较好地增殖,并分化一些根。分化培养基配方有待进一步研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略语表
• 1 前言
• 1.1 课题的提出
• 1.2 山茶属植物组织培养的研究
• 1.2.1 外植体与基本培养基的选择
• 1.2.2 植物生长调节剂的选择
• 1.2.3 再生途径
• 1.3 油茶组织培养的研究
• 1.3.1 子叶、幼胚诱导分化完整植株
• 1.3.2 花药诱导愈伤组织
• 1.3.3 其它外植体诱导愈伤组织
• 1.4 油茶生物技术其他方面的研究
• 1.4.1 同工酶研究
• 1.4.2 分子技术育种
• 1.5 本课题的研究目的与意义
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 技术路线
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 再生体系建立
• 2.3.2 愈伤组织诱导与分化
• 2.4 培养条件
• 2.5 结果观测与数据整理
• 2.6 数据统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 腋芽诱导建立再生体系
• 3.1.1 升汞对带芽茎段消毒的影响
• 3.1.2 基本培养基对腋芽启动的影响
• 3.1.3 TDZ和NAA对腋芽启动的影响
• 3.1.4 NAA和6-BA对腋芽增殖的影响
• 3.1.5 活性炭对壮苗的影响
• 3.1.6 NAA对无菌苗生根的影响
• 3.2 外植体的愈伤组织诱导及分化
• 3.2.1 次氯酸钠对不同外植体消毒的影响
• 3.2.2 不同处理对叶片褐化的影响
• 3.2.3 植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响
• 3.2.4 植物生长调节剂对愈伤组织分化的影响
• 4 讨论
• 4.1 油茶外植体的消毒
• 4.2 活性炭与油茶组培褐变的抑制
• 4.3 外源激素对试管苗形成的促进作用
• 4.4 无根苗的生根试验
• 4.5 外源激素对愈伤组织诱导与分化的促进作用
• 4.6 油茶组培快繁体系建立的可行性
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 附录一、图版及说明
• 附录二、几种培养基的配方