细胞红蛋白在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时表达的研究

论文摘要

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)围产期严重的窒息缺氧造成,HIE患儿多留有不同程度的后遗症.近年来,因窒息缺氧导致的缺氧脑损伤日益受到重视.2002年新发现的细胞红蛋白(CYGB)是继脊椎动物血红蛋白、肌红蛋白和脑红蛋白之后所发现的第四类携氧球蛋白,具有可逆性结合,运输及储存氧的主要生物学功能,推测可能在缺氧缺血性损伤时表达增强,并且可能发挥缺氧诱导的神经保护作用.细胞红蛋白的发现为缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的发病机制及防治方案提供了新的切入点.目前有关CYGB的缺氧缺血后表达试验并不多,并且主要集中在体外实验,活体内缺氧缺血性脑损伤(HIBD)时CYGB的表达变化尚缺乏详细资料,我们采用免疫组织化学法、免疫印迹法,从蛋白水平系统研究了新生7天龄大鼠脑缺氧缺血急性期CYGB在不同时间点表达的变化情况,初步探讨CYGB在脑缺氧缺血早期的表达规律,旨在为脑缺血缺氧相关疾病的发病机理及临床治疗提供理论支持.目的探讨细胞红蛋白在7天龄新生大鼠缺氧缺血急性期脑内的表达特点与规律.方法将7日龄新生Wistar大鼠138只,随机分为缺氧后0,4,12,24,48小时组以及假手术对照组(常氧组),共6组.其中实验组在手术后制成缺氧缺血脑损伤模型,并且在血流阻断0,4,12,24,48小时取脑;对照组为假手术组.采用免疫组化染色法和免疫印迹法从蛋白水平分析CYGB的分布及表达特点.结果免疫组织化学染色显示细胞红蛋白主要表达于皮质,丘脑,海马神经元的胞浆,各缺氧组细胞红蛋白表达数量强度均高于常氧组(对照组),且随时间递增,其中缺氧24、48小时组表达最强.免疫印迹灰度分析结果显示,各缺氧组细胞红蛋白表达量高于常氧组,其差异有高度统计学意义(P<0.000),其中缺氧12小时组细胞红蛋白表达明显高于0、4小时组(P<0.000),缺氧24、48小时组的表达明显高于缺氧12小时组.缺氧0、4小时组间无差别(P>0.05),缺氧24、48小时组间亦无差别(P>0.05).结论7天龄新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑内的细胞红蛋白表达明显增强,并且随着缺氧缺血发展呈现时相性变化,提示细胞红蛋白可能在脑缺氧缺血的适应性调节过程中起重要作用.

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