养阴抗毒胶囊2号对阴虚大鼠模型糖皮质激素受体mRNA和蛋白表达的影响

论文摘要

实验目的:建立外源性糖皮质激素致阴虚证大鼠模型,探讨养阴抗毒胶囊2号（YC2）对模型大鼠血清皮质醇（CORT）水平、肝组织细胞核内糖皮质激素受体（GR）蛋白和mRNA水平的影响,探讨养阴抗毒胶囊减轻激素副作用的机理。实验方法:SD大鼠40只,随机分为空白对照组、阴虚模型组（YD）、养阴抗毒胶囊2号组（YC2）、六味地黄丸组（LD）、桂附地黄丸组（GD）。在不同药物干预后9天后处死,用放射免疫方法检测各组血清皮质醇（CORT）含量;免疫组织化学染色技术测定肝组织细胞核内GR表达情况;RT-PCR测定肝组织糖皮质激素受体mRNA水平。实验结果:阴虚组大鼠与空白对照组相比,血清CORT含量明显升高,说明模型建立成功（P<0.05）;养阴组、六味组大鼠血清CORT含量均不同程度低于阴虚组（P<0.05）,提示两者对外源性GC所致的阴虚大鼠模型血清CORT含量增高有一定的抑制作用。桂附组与阴虚组相比,CORT含量没有差别（P>0.05）,提示GD对外源性GC所致的阴虚大鼠模型血清CORT含量增高没有抑制作用。免疫组化染色结果显示,正常情况下GR在肝脏组织细胞核内广泛表达,免疫组化阳性反应较强。阴虚组大鼠与正常组比较肝组织核内GR蛋白表达减少（P<0.05）;而养阴组大鼠比阴虚组肝组织核内GR蛋白表达增多（P <0.05）,但仍较正常组略低（P<0.05）;六味组大鼠肝组织核内GR蛋白表达较阴虚组增多（P<0.05）,但与养阴组没有区别（P>0.05）;桂附组大鼠肝组织核内GR蛋白表达较正常组减少（P<0.05）,但较阴虚组略高,但没有统计学差异（P>0.05）。将电泳后的凝胶置于Gel Doc 2000凝胶图像分析系统分析,以PCR目的产物的光密度与GPDAH产物的光密度比值为最终结果。采用SPSS 13.0统计软件对光密度比值做单因素方差分析,结果如下:①空白组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.904±0.045,阴虚模型组的比值为0.621±0.027,为空白组GR mRNA水平的比值的68.7%,GR mRNA水平降低（P<0.01）,有统计学意义。②养阴组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.796±0.022,为空白组GR mRNA水平的比值的88.1%,比阴虚模型组提高了19.4%（P<0.01）,有统计学意义,提示养阴抗毒胶囊能够提高阴虚大鼠肝组织GR mRNA水平。③六味组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.724±0.014,为空白组水平的80.1%,与阴虚模型组相比,提高了11.4%（P<0.01）,有统计学意义;与养阴组相比,比值下降8.0%（P<0.01）,有统计学意义。提示养阴药物能够提高阴虚大鼠肝组织GR mRNA水平,而且养阴抗毒胶囊比六味地黄丸更有效。④桂附组大鼠肝组织GR mRNA水平的比值为0.685±0.033,为空白组的比值的75.8%,与阴虚模型组相比,有统计学意义（P<0.01）,提示助阳药对阴虚大鼠肝组织GR mRNA也有影响,但远不如养阴药如养阴抗毒胶囊、六味地黄丸的影响大。结论:本实验中阴虚大鼠模型血清CORT含量明显升高,肝组织细胞核内GR表达明显减少,GR mRNA水平降低。而养阴抗毒胶囊2号能明显降低阴虚大鼠模型CORT水平,提高阴虚大鼠肝组织细胞核内GR表达和GR mRNA的水平,提示这可能是其预防和治疗糖皮质激素不良反应的机理之一。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言和文献回顾
• 正文
• 1 引言
• 2 实验材料
• 3 实验方法
• 4 结果
• 4.1 实验动物一般情况
• 4.2 各组大鼠血清 CORT 含量变化
• 4.3 各组大鼠体重变化
• 4.4 各组大鼠肝组织核蛋白表达情况
• 4.5 各组大鼠肝组织 GR mRNA 水平变化
• 5 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢