蓝染辅助腋淋巴结抽样与微转移检测在乳腺癌术中的应用

论文摘要

2腋淋巴结（Axillary Lymph Node, ALN）状态是影响乳腺癌患者预后的最重要因素,也是术前选择手术方式、术后选择辅助治疗的重要依据。在西方国家,前哨淋巴结活检（sentinel lymph node biopsy, SLNB）、淋巴结抽样（Axillary Node Sampling, ANS）虽然都已用于预测腋淋巴结状况,但包括淋巴结定位和术中淋巴结检测的最佳方案仍存在争议。本研究分为二部分,分别对淋巴结活检、术中淋巴结检测的合理化方案进行探讨:第一部分研究二种注射途径——癌周（Peritumoral, PT）、乳晕下（SA, Subareolar）对染料法SLNB的影响,以及染料法SLNB与染料法SLNB联合ANS预测腋淋巴结的准确性。第二部分探讨术中微转移检测的最佳方法。第一部分:连续收集64例临床Ⅰ～Ⅱ期乳腺癌患者,随机分入SA、PT组。患者麻醉成功后,取1%亚甲蓝（Methylene Blue, MB）5ml注入乳晕周围12点、3点、6点和9点部位皮下或肿瘤周围深部。注射染料后10min,切开皮肤及皮下组织,游离上侧皮瓣至腋窝第Ⅰ水平,寻找、切除蓝染淋巴结,认定为前哨淋巴结（Sentinel Lymph Node, SLN）。无论SLNB成功与否,均在胸小肌外缘（Ⅰ水平）,以腋淋巴结抽样（Axillary Node Sampling, ANS）方式触诊、切除4个可疑淋巴结。分别标记SLN和抽样淋巴结,单独送快速病理检查。然后行腋窝淋巴结清扫（Axillary Lymph Node Dissection, ALND）,腋清扫淋巴结送常规病理检查。应用亚甲蓝进行SLNB时,SA组的成功率、假阴性率、灵敏性、准确性分别为84.9% （28/33）、13.6% （3/3+19）、86.4% （19/3+19）、100%（28/28）;PT组分别为61.3% （19/31）、36.8% （7/7+12）、63.2% （12/7+12）、100% （19/19）,SA、PT组之间的差异具有显著性（p<0.05）。不考虑注射部位时,SLNB的灵敏性、特异性、准确性、假阴性分别为100%、48.5%、63.8%、24.3%;SLNB+ANS则分别为100%、52.3%、67.2%、0%。结果显示在行SLNB时,SA法成功率稍高于PT法;染料法SLNB+ANS的阳性淋巴结检出率高于单用染料法SLNB的检出率。第二部分:应用冰冻切片（Frozen Section, FS）、快速免疫组化（Rapid Immuno-histochemistry, RAPID-IHC）、逆转录聚合酶链反应（Reverse Transcriptase Polyme- rase Chain Reaction, RT-PCR）检测SLN、抽样淋巴结内的转移。以5μm厚度从间隔为50μm的二个层面上对淋巴结冰冻组织连续切取3张切片,1张行HE染色,另外2张行RAPID-IHC,标志物分别为CK19、muc1。冰冻剩余组织行RT-PCR。64例患者用冰冻切片HE、IHC、RT-PCR共检查了348个淋巴结,其中冰冻切片HE染色在37例患者中检出139个转移淋巴结;RAPID-IHC在41例患者中检出152个转移淋巴结。SLNB/ANS术中病检阴性的患者中,RT-PCR检测发现有3个淋巴结表达CK19、mammaglobin,1个SLN同时表达CK19、mucl、mammaglobin。结果显示RT-PCR的灵敏性与冰冻切片HE+RAPID-IHC相当或稍高一些,但由于肿瘤标志物在正常组织中也有少量表达,而且用分子学方法检出转移的临床意义尚不明确,目前,冰冻切片HE+ RAPID-IHC检查是术中病理检查较好的一种选择。但由于本研究样本含量较小,还需要大样本随机对照研究进一步证实。

论文目录

• 主要英文缩略语索引
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一部分 前哨淋巴结活检与腋淋巴结抽样在乳腺癌中的应用
• 1.1 前言
• 1.2 材料与方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 1.5 结论
• 第二部分 淋巴结微转移术中病理检测与术后RT-PCR 检测
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 2.5 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 成果附录
• 致谢