论文摘要
莲心生物碱包括莲心碱、甲基莲心碱、异莲心碱和莲心季铵碱等,具有心血管系统活性,有抗心律失常和降压等作用。从莲子心中提取莲心生物碱方法有溶剂提取法等传统工艺,也有像膜分离等这样的新技术。而本文采用大孔吸附树脂进行莲心生物碱的分离纯化还是第一次。大孔吸附树脂是一种不含交换基团、具有大孔结构的高分子吸附剂,由于比表面积大,因此有较高的吸附量;而且它对吸附质有较好的选择性;还具有吸附速度快,易于解吸附等特点;大孔吸附树脂的物理化学性质稳定,使用周期长且可重复使用,十分节省费用。自由基是人体进行生命活动时所产生的一种活性分子。人体内过多的自由基,可导致细胞和组织器官损伤、诱发各种疾病、加速机体衰老。因此为了寻求抗氧化性能良好的抗氧化剂,对其进行研究也很有必要。本论文选用乙醇对莲子心中的莲心总碱进行粗提,通过考察乙醇浓度、体积和提取时间对回流提取莲心总碱的影响,根据单因素实验,选取适当条件进行正交实验,得到回流提取的最佳工艺:回流提取两次,第一次用固液比(莲子心的质量与乙醇体积之比)为1:10的90%乙醇溶液提取60min,第二次用固液比为1:10的90%乙醇溶液提取45min。其中固液比对提取有显著性影响。得到莲心生物碱的粗提液后进行树脂的吸附与洗脱实验。通过静态吸附量的考察,筛选出适合莲心总碱提纯的最佳树脂型号,最终选用DA201树脂进行实验。通过树脂静态吸附的动力和热力学特征的研究,拟合出吸附的动力学曲线。树脂在24h内达到吸附平衡,说明吸附速度较快。计算热力学数据,证明了DA201树脂对莲心总碱的吸附是具有自发性的物理放热过程。对影响树脂动态吸附与洗脱的各种因素进行研究,通过考察浓度、体积、pH值和流速对吸附和洗脱的影响,设计正交实验,得出了最佳的分离工艺条件。其中吸附条件为:上样液浓度为1.87mg/mL、pH值为10、体积为8BV以及流速为2mL/min,此工艺得到最大吸附量为14.02mg/g。洗脱条件为:乙醇浓度为70%、pH为3,体积为8BV、流速为2mL/min,一次洗脱率达49.17%。为提高提取率,洗脱两次,得出最终洗脱率为76.09%,最终提取率为40.53%。莲心总碱回流提取正交实验得到的粗提液中,最大莲心总碱含量为87.28mg/g,经树脂分离洗脱后,得到的最终莲心总碱含量为35.37mg/g。对莲心总碱的抗氧化性能用微分脉冲伏安法进行测试。在0~0.5V区间内,Ep在0.27V有氧化和还原峰,且氧化还原峰电流随浓度的增大呈线性正相关。为其浓度检测提供电化学方法,也为它的抗氧化性能提供了前提证明。通过莲心总碱对羟基自由基和超氧自由基清除能力的考察,得到莲心总碱抗氧化性优于抗坏血酸,当浓度达到1.0mg/mL时,对羟自由基(OH·)清除率接近90%;对超氧阴离子自由基(O2ˉ·)的清除率高达98.34%,进一步证明了它具有较强的抗氧化性能。