论文摘要
神经胶质瘤是来源于神经上皮的肿瘤,是颅内最常见的恶性肿瘤,约占全部颅内肿瘤的40%～50%,具有高发病率、高复发率、高病死率和低治愈率的特点。其中胶质母细胞瘤的中位生存期不到一年时间。脑胶质瘤异质性高、病因尚未明确,临床研究进展缓慢,目前对于胶质瘤的检测,治疗和预后的效果都不太理想。近几年关于微小分子RNA （miRNAs或microRNAs）的研究日益深入,关于microRNAs （miRNAs或miRs）在神经胶质瘤方面的研究也逐渐兴起。微小分子RNA是一类长20～25个核苷酸的非编码内源性单链小RNA分子,其通过与靶标信使RNA的3’端非翻译区结合,抑制其翻译或直接使其降解,对基因的表达起转录后的调控作用,进而调节细胞的增殖、分化和凋亡等。近年来的研究发现,不同的miRNAs的表达与多种疾病有关,且这些miRNAs十分稳定,是十分有前景的疾病诊断的特异性标志物。此类小分子RNA的发现为胶质瘤的诊断研究提供了新的思路。目的：本研究拟通过实时荧光定量PCR （qRT-PCR）技术对胶质瘤患者血浆和正常人群血浆的miRNAs表达进行比较研究,经过筛选、验证,寻找差异表达的血浆miRNAs,探讨血浆差异表达miRNAs和胶质瘤的诊断、分级及治疗预后的相关性分析,为胶质瘤的早期诊断、病情监测和预后提供依据,并为胶质瘤的治疗提供新的思路和靶点。方法：1、本研究用EDTA-K2血液采集管采集健康人、不同级别的胶质瘤患者、脑膜瘤患者、垂体瘤患者术前（各10例）及10例胶质母细胞瘤（GBM）患者在术后和放化疗后的空腹静脉血2mL,经2次离心后,收集血浆。2、miRNAs提取试剂盒提取血浆miRNAs,利用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）,检测患者血浆中miR-21、miR-128和miR-342-3p在健康人、不同级别胶质瘤患者、GBM患者术前、术后、放化疗后及其它脑肿瘤患者血浆中的表达水平。3、采用SPSS 13.0统计学分析软件,Mann-Whitney U检验对miRNAs数据进行显著性差异分析,P<0.05为差异有统计学意义。受试者工作特征曲线（receive operating eharacteristie curve, ROC）来评估miR-21、miR-128和miR-342-3p作为胶质瘤诊断标记物的特异性和敏感性。结果：（1）与健康对照组比较,miR-21在GBM患者的血浆中表达显著升高,而miR-128和miR-342-3p在GBM患者的血浆中显著降低,它们作为GBM诊断标记物的特异性和敏感性达到90%～100%。（2）血浆miR-21与胶质瘤的恶性程度没有关系,miR-128能区分低级别（Ⅱ）和高级别的胶质瘤（Ⅲ和Ⅳ）,而miR-342-3p的表达水平随着胶质瘤恶性程度的增高而显著降低。（3）与治疗前比较,GBM患者血浆中升高的miR-21在治疗后显著降低,miR-128和miR-342-3p的水平在治疗后显著升高,恢复后的水平与对照组比较,没有显著差异。（4）miR-21、miR-128和miR-342-3p只在胶质瘤患者的血浆中有显著变化,而脑膜瘤和垂体瘤患者血浆中这三种miRNAs的表达水平与健康对照组比较,没有显著差异。结论：血浆中游离的miR-21、miR-128和miR-342-3p能作为胶质瘤诊断的一种新的血浆标记物,且能作为监测胶质瘤治疗的一种有效的血浆标志物。