骨疏丹活性成分的测定和在大鼠体内的药物动力学研究

论文题目: 骨疏丹活性成分的测定和在大鼠体内的药物动力学研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 药物分析学

作者: 李遇伯

导师: 李发美

关键词: 骨疏丹,提取工艺,药物动力学,活性成分

文献来源: 沈阳药科大学

发表年度: 2005

论文摘要: “骨疏丹”处方是基于传统中医学和现代医学对骨质疏松症的认识，利用“中药小复方精选系统操作技术平台”及“《普济方》数据库管理系统”精心拟定而成。骨疏丹方剂由淫羊藿、蛇床子、骨碎补和丹参四味中药组成。本室的前期研究证明了该方的促成骨细胞骨形成作用，并发现了它的活性部位和一些活性成分。本文从君药淫羊藿的正丁醇层分离得到5个化合物（金丝桃苷、淫羊藿苷、朝藿定B、朝藿定C和肌醇），臣药骨碎补的正丁醇层分离得到2个化合物（柚皮苷和新北美圣草苷），并采用UV、IR、NMR和MS进行结构确定。建立了君药淫羊藿中3种有效成分—淫羊藿苷、朝藿定B和朝藿定C同时定量的高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil ODS 2，流动相为乙腈-0.4％冰醋酸水溶液（25∶75，v／v），检测波长为260nm，流速为1.0mL·min-1，内标为甲氧苄啶。结果表明：淫羊藿苷、朝藿定B和朝藿定C分别在0.21-172μg·mL-1、0.18-144μg·mL-1和0.16-132μg·mL-1范围内，线性良好（r≥0.999 6）；平均回收率分别为97.2％、98.0％和98.3％；RSD分别为2.0％、2.1％和1.5％（n=9）。测定了16个不同产地不同品种淫羊藿药材中淫羊藿苷、朝藿定B和朝藿定C的含量。不同产地不同品种淫羊藿药材中各成分的含量差别较大。建立了臣药骨碎补中柚皮苷和新北美圣草苷2种成分同时定量的高效液相色谱法，Hypersil ODS2为色谱柱，乙腈-0.4％冰醋酸水溶液（20∶80，v／v）为流动相，检测波长为283nm，流速为1.0mL·min-1。柚皮苷和新北美圣草苷分别在10-400μg·mL-1和12-480μg·mL-1范围内，线性良好（r≥0.999 7）；平均回收率分别为100.0％和99.4％；RSD分别为1.4％和2.0％（n=9）。测定了7个不同产地骨碎补药材及5个易混品或伪品中柚皮苷和新北美圣草苷的含量。结果表明：骨碎补正品与易混品或伪品中的成分差异很大。本文对骨疏丹方剂的提取工艺进行了研究。采用正交试验设计法，以淫羊藿苷、蛇床子素、柚皮苷和丹参酮ⅡA的含量以及浸膏重量为评价指标，对提取溶剂用量、提取溶剂浓度和提取时间三个因素进行优化，确定了骨疏丹方剂的最优提取工艺为：12倍量75％乙醇为提取溶剂，提取3次，每次90min。采用高效液相色谱法测定了骨疏丹方剂中淫羊藿苷、蛇床子素、柚皮苷和丹参酮ⅡA的含量，淫羊藿苷、蛇床子素、柚皮苷和丹参酮ⅡA分别在11.8-118μg·mL-1、38.5-462μg·mL-1、15.0-299μg·mL-1和1.90-38.0μg·mL-1范围内，线性良好（r≥0.9998）；平均回收率分别为99.4％、99.2％、99.1％和97.8％。本研究为骨疏丹方剂的质量控制提供了定性、定量分析依据。建立了测定大鼠血浆中朝藿定C和蛇床子素含量的反相高效液相色谱分析方法，分别以卡马西平和醋酸氟轻松为内标，血浆经液-液萃取后进样分析。朝藿定C和蛇床子素分别在0.05-4μg·mL-1（r=0.9990）和0.052-5.2μg·mL-1（r=0.9952）范围内线性关系良好。方法的定量限分别为0.05μg·mL-1和0.052μg·mL-1。比较研究了灌胃给予大鼠骨疏丹和淫羊藿，蛇床子药液后朝藿定C和蛇床子素的药物动力学，测定了朝藿定C和蛇床子素的血药浓度-时间曲线，计算其相应药物动力学参数。灌胃给予大鼠相对等量的淫羊藿和骨疏丹药液后，淫羊藿中朝藿定C的Cmax为0.862μg·mL-1，而骨疏丹药液朝藿定C的Cmax为0.806μg·mL-1，tmax分别为2.5h和3.0h；t1／2分别为8.3 h和8.0 h，AUC0-∞分别为7.90和9.35μg·mL-1·h。灌胃给予大鼠相对等量的蛇床子和骨疏丹药液后，蛇床子中蛇床子素的Cmax为0.778μg·mL-1，而骨疏丹药液蛇床子素的Cmax为1.18μg·mL-1，tmax分别为1.0 h和1.5 h，t1／2分别为3.6h和4.0h，AUC0-∞分别为3.55和5.11μg·mL-1·h，药动学参数Cmax具有显著性差异；方中各味药配伍使用后能显著影响朝藿定C和蛇床子素在大鼠体内的药动学行为。本研究在中医药学理论的指导下，将中药学、分析化学和药物动力学相结合，优化了骨疏丹的提取工艺，建立了骨疏丹的质量控制方法。比较研究了灌胃给予大鼠骨疏丹和相应单味药材提取物后血浆中朝藿定C和蛇床子素的药物动力学，描述了有效成分在体内的动态过程，为中药现代化做了有意义的探索。

论文目录:

中文摘要

ABSTRACT

第一章引言

1.1 中药和中药方剂研究概况

1.1.1 中药和中药方剂的研究现状

1.1.2 中药活性成分(群)

1.1.3 中药的质量控制

1.2 骨质疏松及其研究概况

1.2.1 骨质疏松症定义及分类

1.2.2 骨质疏松症的病因和发病机制

1.2.3 成骨细胞的生物学特征

1.2.4 中医药治疗骨质疏松症研究进展

1.3 骨疏丹处方方解及各药味研究概况

1.3.1 骨疏丹处方及方解

1.3.2 骨疏丹的促成骨细胞的骨形成作用

1.3.3 骨疏丹组成药味的研究概况

1.3.3.1 淫羊藿的化学成分及药理作用

1.3.3.2 蛇床子的化学成分及药理作用

1.3.3.3 骨碎补的化学成分及药理作用的研究

1.3.3.4 丹参的化学成分及药理作用

1.4 中药药动学研究概况

1.5 本文的主要研究内容

第二章淫羊藿和骨碎补中活性成分的提取分离

2.1 仪器、材料与试药

2.2 淫羊藿中活性成分的提取分离和结构确定

2.2.1 淫羊藿中活性成分的提取分离

2.2.2 淫羊藿中活性成分的结构鉴定

2.2.3 小结

2.3 骨碎补活性成分的分离与结构确证

2.3.1 骨碎补中活性成分的提取分离

2.3.2 骨碎补中活性成分的结构鉴定

2.3.3 小结

第三章淫羊藿和骨碎补活性成分的测定

3.1 仪器、材料与试药

3.2 淫羊藿活性成分的含量测定

3.2.1 色谱条件与系统适用性试验

3.2.2 淫羊藿提取条件的考察

3.2.3 淫羊藿苷、朝藿定B和朝藿定C的定量测定方法

3.2.4 小结

3.3 骨碎补活性成分的含量测定

3.3.1 色谱条件与系统适用性试验

3.3.2 骨碎补提取条件的考察

3.3.3 新北美圣草苷和柚皮苷的定量测定方法

3.3.4 小结

第四章骨疏丹活性成分的测定和提取工艺的研究

4.1 仪器、材料与试药

4.2 骨硫丹方剂提取工艺的研究

4.2.1 实验设计

4.2.2 实验方法

4.2.3 实验结果

4.3 骨疏丹活性成分含量测定的方法学研究

4.4 小结

第五章骨疏丹活性成分在大鼠体内的药物动力学研究

5.1 仪器、材料与试药

5.2 大鼠血浆中朝藿定C分析方法的建立

5.2.1 色谱分析条件

5.2.2 大鼠血浆样品的预处理

5.2.3 血浆样品分析方法确证

5.3 朝藿定C在大鼠体内的药物动力学研究

5.3.1 灌胃药液的制备

5.3.2 给药方案和血浆样品的采集

5.3.3 朝藿定C在大鼠体内的药动学研究结果

5.4 大鼠血浆中蛇床子素分析方法的建立

5.4.1 色谱分析条件

5.4.2 血浆样品的预处理

5.4.3 血浆样品分析方法确证

5.5 蛇床子素在大鼠体内的药物动力学研究

5.5.1 灌胃药液的制备

5.5.2 给药方案和血浆样品的采集

5.5.3 蛇床子素在大鼠体内的药动学研究结果

5.6 小结

第六章结论

参考文献

附图

致谢

发表文章目录

发布时间: 2006-12-14

参考文献

[1].淫羊藿朝藿定F的检测、提取及其活性筛选与分析[D]. 安叶娟.陕西师范大学2018
[2].石菖蒲对卒中后抑郁大鼠模型血清脑源神经营养因子和血管内皮生长因子的影响[D]. 于路航.河北大学2018
[3].血管性认知障碍大鼠相关神经递质的动态变化及芎麻滴丸干预作用[D]. 夏嘉忆.哈尔滨商业大学2016
[4].LMG对2型糖尿病模型GK大鼠的降糖作用及机制研究[D]. 杨涛.广州中医药大学2016
[5].中药复胃煎逆转大鼠胃癌前病变及对其相关因子影响的实验研究[D]. 陆金华.浙江中医药大学2013
[6].异麦芽寡糖对UC大鼠结肠内容物中丁酸及结肠组织中ITF含量的影响[D]. 裘伟国.浙江中医药大学2013
[7].荷叶干预治疗预防大鼠非酒精性脂肪肝的实验研究[D]. 叶小丹.浙江中医药大学2013
[8].Liguzinediol在犬体内药代动力学及在大鼠体内组织分布和排泄研究[D]. 朱晓雯.南京中医药大学2014
[9].牛蒡根多糖对STZ引起的高血糖大鼠的降血糖效应[D]. 袁平川.皖南医学院2018
[10].榆干离褶伞溶栓酶对尼古丁诱导大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用及抗血小板作用[D]. 刘雪.延边大学2018

骨疏丹活性成分的测定和在大鼠体内的药物动力学研究

猜你喜欢