C型钠尿肽对豚鼠胃窦平滑肌细胞延迟整流钾电流的影响

论文摘要

自从Sudoh等人1990年发现C型钠尿肽（C-type natriuretic peptide,CNP）以来,人们对CNP生理效应的认识不断深入,CNP对中枢神经系统和心血管系统以及胃肠道均有调控作用。CNP通过抑制大鼠视上核精氨酸加压素（AVP）的基础分泌而调节机体的水、电解质平衡;CNP使局部血管舒张,抑制人、大鼠、豚鼠的胃窦平滑肌自发性收缩活动,还可抑制平滑肌细胞和软骨细胞的增殖。CNP引起血管舒张的机制是通过激活血管平滑肌细胞膜上的可溶性鸟苷酸环化酶和,IK（Ca）而实现的。但是,CNP抑制胃窦平滑肌自发性收缩活动的离子通道机制尚不十分清楚,阐明这个问题对胃肠动力学的研究有重要的理论意义。 作为细胞膜信息传递体系重要组成部分之一的钾离子通道,在维持平滑肌细胞兴奋性、收缩性方面发挥重要作用。根据本研究室前期研究发现:在豚鼠胃窦平滑肌上的外向钾电流为延迟整流性钾电流(delayed rectifier potassium current.IK（v）和钙激活钾电流(calcium-activated potassium current,IK（Ca）。CNP对豚鼠胃窦平滑肌和其它类型平滑肌上的I(K（Ca）有增强作用。但是,CNP对豚鼠胃窦平滑肌上IK（v）的影响及其作用机制尚不清楚。因此,本文的研究目的是:在用Ⅱ型胶原酶急性分离的豚鼠胃窦平滑肌细胞上,利用膜片钳技术的全细胞记录法观察C型钠尿肽对延迟整流钾电流的影响,并探讨其作用机制。 本文的主要实验结果如下: 1.膜电位钳制在-60mV,电极内液含有钙离子螫合剂EGTA10mM时,去极化阶跃刺激可以引导出豚鼠胃窦平滑肌细胞延迟整流性钾电流IK（v）。去极化刺激至+60mV时,其平均电流值为921.84±33.49 pA（n=60）。 2.CNP可以明显抑制IK（v）,并具有量效关系。当CNP浓度为1μM、0.1μM、0.01μM时,分别抑制IK（v）至对照组的67.71±2.34%（n=14）、78.37±2.62%（n=10）和86.11±1.63%（n=7）。三者两两相比较均有显著性差异。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 第二章 材料与方法
• 1 实验设备
• 2 药品及溶液配制
• 3 电生理标本制备
• 3.1 实验动物
• 3.2 单细胞制备
• 4 电生理实验
• 4.1 膜片钳实验技术原理
• 4.2 记录模式
• 4.3 膜片微电极制备
• 4.4 千兆封接的形成
• 4.5 细胞膜电流的记录
• 5 统计学处理
• 第三章 实验结果
• Kv和I_KCa的引导及其电学特性'>1 I_Kv和I_KCa的引导及其电学特性
• Kv的影响'>2 CNP对I_Kv的影响
• Kv抑制的时-效关系'>2.1 CNP对I_Kv抑制的时-效关系
• Kv抑制的量-效关系'>2.2 CNP对I_Kv抑制的量-效关系
• Kv的作用机制'>3 CNP抑制I_Kv的作用机制
• Kv作用的影响'>3.1 Ly83583对CNP抑制I_Kv作用的影响
• Kv作用的影响'>3.2 Zaparinast对CNP抑制I_Kv作用的影响
• Kv作用的影响'>3.3 KT5823对CNP抑制I_Kv作用的影响
• 第四章 讨论
• 1 豚鼠胃窦平滑肌外向钾电流的特性与分离
• Kv的影响'>2 CNP对I_Kv的影响
• Kv的作用机制'>3 CNP抑制I_Kv的作用机制
• 4 实验结果的意义
• 5 尚待解决的问题
• 结论
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢