论文摘要
目的:（1）研究血管性血友病因子（vWF）和组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）在人胃癌细胞BGC-823中的表达及其相互作用。（2）探讨vWF和HDAC1对人胃癌细胞BGC-823增殖、细胞形态、粘附、侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法:（1）采用免疫组织化学技术及RT-PCR法检测抗体作用前后vWF和HDAC1蛋白及其mRNA在BGC-823细胞表达水平的变化。（2）分别单独及联合应用vWF抗体（vWF Ab）和HDAC1抗体（HDAC1 Ab）处理细胞,采用MTT法、倒置显微镜、粘附抗体抑制实验及Boyden小室法检测vWF和HDAC1对BGC-823细胞增殖、形态、粘附、侵袭和迁移能力的影响。结果:（1）BGC-823细胞能够表达vWF和HDAC1蛋白及其mRNA;经HDAC1Ab处理后,细胞中vWF mRNA相对含量由处理前的0.2134增加到0.3214,vWF蛋白表达增强;经vWF Ab处理后,细胞中HDAC1 mRNA和蛋白的表达均无明显变化。（2）MTT法检测显示vWF Ab和HDAC1 Ab单独及联合作用均对BGC-823细胞增殖有抑制作用,随着作用时间延长,抗体浓度增大,增殖抑制率增加,表明增殖抑制作用呈时效一量效关系,与对照组比较有统计学意义（P＜0.05）。（3）细胞形态学观察vWF Ab和HDAC1 Ab单独及联合作用均对细胞生长具有明显的抑制作用,细胞形态改变,部分贴壁细胞收缩变圆、漂浮;细胞数目明显减少,与对照组比较有统计学意义（P＜0.05）。（4）粘附抗体抑制实验结果显示vwF Ab处理组胃癌细胞BGC-823的粘附率较未处理组明显下降（p＜0.01）;HDAC1 Ab处理组细胞粘附率与对照组比较无明显变化;Ⅳ型胶原高浓度组较低浓度组细胞粘附率增大（p＜0.01）。（5）Boyden小室侵袭实验结果显示vWF Ab处理组细胞侵袭穿膜细胞数为54.86±9.94,与空白对照组85.86±25.02相比较差异具有统计学意义（P＜0.01）;HDAC1 Ab处理组为85.80±7.42、联合作用组为83.60±6.50,分别与对照组比较,侵袭穿膜细胞数差异均无统计学意义（P＞0.05）。（6）Boyden小室迁移实验结果显示vWF Ab处理组细胞迁移穿膜细胞数为60.47±16.20,与空白对照组105.27±12.12相比较差异具有统计学意义（P＜0.01）;HDAC1Ab处理组为99.26±10.4、联合作用组为99.0±6.91,分别与对照组比较,迁移穿膜细胞数差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论:（1）人胃癌细胞BGC-823能够表达vWF和HDAC1蛋白及其mRNA;HDAC1可调节vWF的表达。（2）vWF和HDAC1在体外能够影响胃癌细胞BGC-823的增殖,并呈时间、剂量依赖性。两者在体外能诱导细胞形态改变。（3）vWF在体外能够促进BGC-823细胞与细胞外基质的粘附;且细胞与细胞外基质的粘附呈时间依赖性;提示vWF在BGC-823细胞体外的侵袭、迁移过程中起重要促进作用。（4）Ⅳ型胶原能够诱导BGC-823细胞的粘附,呈剂量依赖性。（5）HDAC1对于胃癌细胞BGC-823的粘附、侵袭、迁移能力无明显直接影响,提示HDAC1对BGC-823的影响主要在早期增殖阶段。
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