Runx2在过量氟激活成骨细胞过程中的作用研究

论文摘要

在氟骨症发生发展中,成骨细胞(OB)功能活跃是一个发生较早、并起主导作用的环节。氟化物激活OB的机制并未完全阐明,特别是氟对OB的特异性转录因子Runx2的影响迄今尚未见报道。本文结合大鼠氟中毒动物模型和体外培养OB染氟,应用形态学、免疫组化、分子生物学等多项技术,对Runx2及其有关下游产物ALP、OPG、ColⅠ等在氟影响下的表达情况进行了研究。在慢性氟中毒大鼠,我们观察到OB内Runx2的表达有所增强,但未达到统计学差异显著的程度。而在体外培养并染氟的OB,我们发现Runx2从mRNA到蛋白质水平的表达均显著增强;在相同的时间段和染氟浓度下,与Runx2作用有关的下游产物ALP、OPG、ColⅠ从mRNA到蛋白质表达亦明显上调;与ALP、ColⅠ密切相关的矿化结节形成,也随着染氟剂量的增加和作用时间的延长而加强。所有这一切都有力地提示,在氟化物干扰骨代谢所涉及的众多因素中,Runx2很可能处于重要地位,是全面阐明氟骨症发生机制值得特别关注的一个靶标。

论文目录

• 缩写词表
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1. 氟骨症的病变特点
• 2. 氟化物促进成骨活动的调控因素
• 3. Runx2在骨发育中的作用
• 4. 小结
• 第二章 实验材料及方法
• 1. 主要试剂与主要实验仪器
• 1.1 试剂及来源
• 1.2 实验试剂配制
• 1.3 主要实验仪器
• 2. 方法
• 2.1 慢性氟中毒大鼠短期动物实验模型复制
• 2.2 慢性氟中毒大鼠长期动物实验模型复制
• 2.3 体外细胞培养:成骨细胞染氟试验
• 第三章 实验结果
• 1. 整体动物实验
• 1.1 一般观察结果
• 1.2 大鼠血清Ca、Mg、P及ALP检测结果
• 1.3 骨组织病理所见
• 1.4 骨组织免疫组化染色结果
• 1.5 骨组织Runx2原位杂交结果
• 2. 成骨细胞培养
• 2.1 形态观察及鉴定
• 2.2 成骨细胞在不同氟浓度、不同时间下MTT实验结果
• 2.3 不同染氟浓度对成骨细胞超微结构的影响
• 2.4 不同染氟浓度下成骨细胞矿化诱导结果
• 2.5 不同染氟时间、浓度下Runx2的表达情况
• 2.6 不同染氟时间、浓度下OPG的表达情况
• 2.7 不同染氟时间、浓度下ALP的表达情况
• 2.8 不同染氟时间、浓度下ColⅠ的表达情况
• 图片
• 第四章 讨论
• 1. 过量氟对体外培养的成骨细胞增殖活力的影响
• 2. 过量氟对Runx2表达的影响及该因子在成骨活动中的作用
• 3. 过量氟对成骨细胞分泌的OPG影响
• 4. 过量氟对骨细胞外基质胶原的表达及骨矿化的影响
• 结论
• 参考文献
• 个人简历及攻博期间发表的学术论文
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致 谢