论文摘要
寄生疫霉产生的ParA1是一种蛋白激发子,可诱导烟草叶片细胞发生过敏性坏死反应。表皮毛是叶片上最外面的结构,起着第一道防御屏障的作用。ParA1能否引起表皮毛细胞的过敏反应?表皮毛对ParA1的反应与叶片其它组织的反应有何关系?本文着重对这两方面进行了深入研究。 本研究证实,ParA1喷施处理烟草叶片后可引起表皮毛发生微敏反应。ParA1喷施处理烟草叶片后,研究发现,表皮毛细胞细胞膜通透性增强、活性氧发生爆发和染色质浓缩。分离获得表皮毛细胞,提取RNA,RT-PCR分析表明,ParA1可诱导烟草叶片表皮毛中过敏反应标志基因hin1的表达。提取表皮毛基因组DNA,琼脂糖电泳分析表明,ParA1可诱导烟草叶片表皮毛细胞中基因组DNA的断裂。这些现象都说明ParA1诱导了表皮毛细胞的Micro-HR。 进一步研究了表皮毛与叶片其它细胞对ParA1发生微敏反应的时间顺序。结果表明,表皮毛发生微敏反应明显快于叶片其它细胞。ParA1处理烟草后,表皮毛在3个小时发生明显的细胞膜通透性增强、氧爆发和染色质凝集,而叶片其它细胞在6个小时才发生以上现象。ParA1处理后3小时可诱导表皮毛细胞内微敏反应标志基因hin1的表达,而叶片其它细胞在6小时诱导表达。表皮毛细胞在处理后15小时发生DNA断裂,而叶片其它细胞在18小时发生。 以上结果表明,表皮毛和叶片其它细胞在ParA1处理后都发生了微敏反应,且表皮毛细胞发生微敏反应的时间要早于叶片其它细胞。那么是否是叶片最外层结构——表皮毛,先接收激发子ParA1的信号,发生微敏反应,再经信号传导,引起叶片表皮细胞及叶肉细胞发生微敏反应的呢?如果这种情况存在,那么又是如何进行信号传导的呢?哪些因子在该过程中起作用?这些疑问都有待于开展进一步的研究解答。
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