论文摘要
目的（1）建立体外培养人心肌成纤维细胞（hCFs）的方法,观察体外培养的hCFs的生物学特性（2）研究碱性成纤维细胞生长因子（Basic fibroblast growth factor bFGF）对hCFs胶原合成的影响（3）探讨bFGF对人心肌成纤维细胞胶原合成的影响与心房颤动的相关机制。方法用消化、差速贴壁法原代培养心肌成纤维细胞,2-3代细胞用于实验,倒置显微镜下观察细胞形态,抗纤维连接蛋白抗体免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。实验分为两组:（1）对照组,未加任何诱导剂培养24小时。（2） bFGF干预组,分别加入1ng/ml、5ng/ml、10ng/mlbFGF培养24小时。应用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）测定I型胶原、III型胶原mRNA表达水平。结果（1） hCFs可在体外成功的培养传代,体外可连续传6-8代。显微镜下细胞形态良好,细胞免疫荧光染色可见细胞浆波形蛋白抗体、α-SMA抗体染色呈阳性,显红色,纯度大于98%。VWF抗体染色阴性。台盼蓝排斥实验,细胞存活率达90%以上。（2） 1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml浓度的bFGF均能促进体外培养的hCFs的I型胶原RNA表达水平（P<0.05）。结论本研究观察到bFGF能直接促进体外培养的hCFsI型胶原mRNA表达水平的表达,作用的特点呈浓度依赖性。推断bFGF是又一致心肌纤维化的生物活性物质,与其他已发现的神经内分泌激素一细胞因子共同参与心肌重构的病理生理过程。
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