PML及PML-NBs调控细胞凋亡机制的研究

论文摘要

细胞内多种机制都执行着“宁死勿错（better dead than wrong）”这一规则，这就意味着那些基因组受损或失调的细胞将会通过细胞凋亡的方式被剔除，以维持机体的正常功能。一旦细胞凋亡调控出现障碍，细胞自稳平衡（cell homestasis）受到破坏，机体就可能出现诸如肿瘤、自身免疫性疾病、神经退行性病变等疾病，因此细胞凋亡研究一直是生命科学领域的热点。新近的研究发现早幼粒细胞白血病蛋白（promyelocytic leukemia，PML）在多个凋亡信号转导通路中发挥着关键性的调控作用，PML缺失能够显著抑制电离辐射、CD95／Fas、神经酰胺、TNF、IFN等诱发的细胞凋亡。研究揭示：PML借助N端的RBCC结构自身寡聚化并募集其它蛋白形成其赖以发挥功能的PML-NBs（PML nuclear bodies），一个与核基质相连的、动态的亚核多蛋白复合物，它作为染色质间区室（interchromatin compartment，IC）的功能单位，满足了高层次真核基因表达调控模式的时空要求，参与调控多种重要的细胞学事件。对于PML及PML-NBs在细胞凋亡中的功能作用，Bernardi精辟的概括为：PML及PML-NBs可以作为一种分子接线板（molecular hubs）选择性地动态地调控凋亡相关的转录事件，诱导或／和增强细胞凋亡的发生。 新的研究进展揭示：细胞凋亡调控中特别引人关注的两个转录调控分子p53和Daxx均能够定位到PML-NBs，并且三者间两两相互作用形成了在细胞凋亡调控具有重要功能意义的PML-p53-Daxx转录调控网络，对于这个网络的研究发现：p53定位到PML-NBs后发生特异位点的磷酸化和乙酰化，这些修饰直接促进了p53转录激活下游凋亡相关基因进而诱发细胞凋亡的功能；对于Daxx来说，在PML-NBs中的定位也是其发挥凋亡调控功能所必须的；而Daxx能够调控p53的转录激活能力，并且这种调控关系同样受到PML的调控。由此可以看到：PML、p53、Daxx三者间调控关系的研究对于揭示细胞凋亡调控功能具有尤为重要的科学意义。而已有的研究也同时提示：PML对于p53的调控是复杂，除了对修饰的调控可能还存在其它的调控形式；虽然已经证实Daxx可以调控p53的转录激活能力，但是对于究竟是抑制还是增强尚无定论?另外，Daxx是否还可以通过其它的途径，如稳定性来调控p53? PML又是如何调控Daxx对p53的调控?这些科学问题正是我们所关心的，本研究仅就其中的部分问题进行了探索，并取得了以下的研究进

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分：PML缺失细胞模型的构建
• 1.实验材料和方法
• 2.实验结果
• 3 讨论
• 4.小结
• 参考文献
• 第二部分：PML缺失对P53调控功能的影响
• 1.实验材料和方法
• 2 实验结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 参考文献：
• 第三部分 DAXX调节P53转录调控功能的研究
• 1.实验材料和方法
• 2.实验结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 参考文献：
• 第四部分：PML-P53-DAXX转录调控网络在TSA诱导细胞凋亡的中功能意义
• 1.实验材料和方法
• 2.实验结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 参考文献
• 总结
• 致谢
• 附录1 缩略语一览表
• 附录2 实验用品、实验设备及材料
• 附录3 发表文章全文与文献综述
• 附录4 博士期间发表的论文和参编的论著