嵌合型PCV1-2灭活疫苗生产用PK-15细胞库和PCV1-2种毒库的建立及鉴定

嵌合型PCV1-2灭活疫苗生产用PK-15细胞库和PCV1-2种毒库的建立及鉴定

论文摘要

猪圆环病毒2型(porcine circovirus2, PCV2)与猪群中发生的多种传染病相关,它己被证明是引起断奶仔猪多系统衰弱综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS)等疾病的重要病原体。自1991年在加拿大断奶仔猪群中首次发现PMWS以来,世界上许多养猪国家和地区均已报道了该病的发生和流行。该病的主要临床症状是消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、皮肤苍白及黄疸。目前国内外学者都在致力于有效控制和消灭PCV2流行的有效疫苗的研制并己取得了一定进展,有些疫苗已经进入临床试验和综合评价中。本实验室研制的嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活疫苗可以有效地诱导免疫猪产生对PCV2感染的保护性免疫应答。本研究的目的在于建立PCV1-2灭活疫苗生产用三级细胞库,以保证PK-15细胞作为病毒培养基质的安全性。同时,建立PCV1-2三级种毒库,为疫苗的生产提供种子。1嵌合型PCV1-2灭活苗生产用PK-15细胞库的建立及鉴定建立PCV1-2灭活疫苗生产用三级细胞库,保证PK-15细胞作为病毒培养基质的安全性。根据2000年版《中华人民共和国兽用生物制品规程》对生物制品生产用传代细胞系的要求,对PK-15细胞进行核型分析、致肿瘤性等一系列基础性试验。结果表明:所建立和保存的PK-15细胞染色体为2n=38,经过对比分析,在基础细胞库中存在的染色体标志,在最高代次细胞中也存在,与基础细胞库细胞相比,所有细胞的染色体模式数均低于10%,并且核型相同;将三个细胞库的种子分别传至最高限制代次45代,皮下接种裸鼠12周无肿瘤形成;没有污染细菌、真菌、支原体和外源病毒,符合2000年版《中华人民共和国兽用生物制品规程》疫苗生产用细胞库要求,可以作为嵌合型PCV1-2灭活疫苗生产的细胞。2PCV1-2种毒库的建立及鉴定为了保证生产疫苗的质量和稳定性,建立了疫苗生产用PCVl-2的三个种毒库,即原始种毒库、基础种毒库和工作种毒库。按照2005年第三版《中华人民共和国兽药典》对生产所用毒种的要求,用间接免疫荧光试验(IFA)对各批次毒种病毒滴度进行测定,并进行细菌、真菌、支原体和外源病毒的检测,确保种毒纯净。嵌合病毒PCV1-2各批次种毒滴度均在104.0TCID50/mL以上;无细菌、支原体及外源病毒污染,符合2005年第三版《中华人民共和国兽药典》要求,可以作为PCV1-2灭活疫苗生产的种毒。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 符号说明
  • 前言
  • 1 PCV病原学
  • 2 PCV的分子生物学特性
  • 3 PCV2的流行病学特征
  • 4 致病机理
  • 5 PCV2的防制
  • 6 本研究的前期基础工作
  • 第一章 嵌合型PCV1-2灭活苗生产用PK-15细胞种库的建立及鉴定
  • 摘要
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 第二章 PCV1-2种毒库的建立及鉴定
  • 摘要
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 全文小结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].携带分子标记的PCV1-2嵌合病毒的构建及其生物学特性的初步分析[J]. 中国预防兽医学报 2018(09)
    • [2].嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)及PCV2 ORF2真核表达质粒对商品猪的免疫保护[J]. 中国兽医学报 2009(09)
    • [3].嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)灭活苗对商品猪免疫保护效力的研究[J]. 畜牧兽医学报 2013(12)

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