论文摘要
第一部分文献综述通过大量文献进行宫内窘迫脑损伤的文献综合研究,分两大部分。第一部分,对祖国医学关于宫内窘迫脑损伤的病名、症状、病因病机、治疗等方面进行了详细的分析,特别是对针灸治疗宫内窘迫脑损伤的国内外进展进行了评述,认为针刺是治疗宫内窘迫脑损伤的有效方法之一,为本研究应用针刺治疗宫内窘迫脑损伤的实验研究奠定了扎实的临床基础。第二部分,对现代医学对宫内窘迫脑损伤进行综述,引起HIBD的机制十分复杂,近年来,对其发病机理的研究不断深入,虽然HIBD的确切机理至今尚未完全澄清,但随着分子生物学研究的进展,从分子水平继续对新生儿及新生动物脑缺氧缺血作深入研究,必将为HIBD防治带来新的希望。目前尚且没有治疗儿童脑病的特效中西药,中外专家展开对该病的一系列研究,取得了一定成果。其中,针灸疗法日益引起国际的重视,有待进一步深入研究。第二部分实验研究目的:从运动能力测试、学习和记忆能力测定、细胞凋亡、凋亡相关基因蛋白Bcl-2、Bax表达,以及HE病理形态学等方面,探讨宫内窘迫脑损伤引起新生大鼠学习记忆障碍、行为学障碍的可能机理,以及针刺改善学习记忆障碍以及行为学障碍的可能机制。方法:分离并结扎孕鼠双侧子宫动脉,完全阻断血供25min娩出胎鼠,制成宫内窘迫脑损伤模型,成功的模型再随机分入针刺组和模型组,每组各8只;正常组,手术过程中仅用止血钳夹住孕鼠子宫颈,马上取出胎鼠,8只。针刺组经治疗后,各组都进行行为学测试后,以HE染色观察各组动物脑组织病理形态学变化,以及脑组织细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-2、Bax表达的变化。结果:1.行为学指标1.1学习记忆能力（Y型迷宫）三组错误反应次数（EN）及错误反应次数差值比较,针前（14d）方差分析F=17.45,P＜0.0001,组间差别有统计学意义,再组间两两比较,正常组与模型组、针刺组差别有统计学意义,P＜0.05,模型组与针刺组差别无统计学意义。经治疗后,方差分析F=75.83,P＜0.0001,组间差别有统计学意义,再三组间分别两两比较,任何两者均有统计学差异,组间差别有统计学意义。1.2悬吊实验针前（14天时）,正常组前腿抓住一水平的塑料绳平均时间30.19±15.03,平均得分2.5分;模型组平均时间12.19±6.37,平均得分1.75分;针刺组平均时间10.22±7.03,平均得分1.25分,方差分析,组间差别有统计学意义,再组间两两比较,模型组、针刺组与正常组比较,差异有显著性,P＜0.05,针刺组模型组差别无统计学意义,P＞0.05。针后（33天时）,正常组前腿抓住一水平的塑料绳平均时间长达375.16±42.50,平均得分5分;模型组平均支持时间只有56.08±49.97,平均得分2.5分;针刺组平均时间177.86±93.22,平均得分3.75分,三组之间两两组间比较,差异均有统计学意义,P＜0.05。1.3斜坡实验治疗前（14天时）,正常组平均耗时7.13s,针刺组平均11.80s,模型组平均15.15s。组间两两比较,模型组、针刺组与正常组比较,差异有显著性,针刺组模型组差别无统计学意义。针后（33天时）,正常组平均耗时2.94s,针刺组平均耗时5.78s,模型组平均耗时10.40s,两两组间比较,正常组或针刺组与模型组比较,差异有统计学意义,P＜0.05,但正常组与针刺组比较,差异无统计学意义,P＞0.05。1.4旷场实验针前（14天时）正常组平均得分1.38分,模型组和针刺组无差别,平均得分均为0.75分。针后（33天时）正常组平均得分1.88分,模型组平均得分1.38分,针刺组平均得分1.75分,三组旷场实验得分比较,针前针后三组旷场实验得分比较,差别均无统计学意义。2.针刺对细胞凋亡的影响正常组大鼠脑细胞凋亡数极少,为（1.0±0.21）,而模型组较高,为（20.00±3.18）,两组间比较,P＜0.01,差异有显著性;而针刺组大鼠脑细胞凋亡数为（9.05±2.07）,介于两组之间,采用t检验与正常组和模型组分别比较,均P＜0.05,差异有显著性。3.针刺对凋亡相关基因蛋白表达Bcl-2、Bax的影响正常鼠脑组织几乎不表达bcl-2（0.51±0.24）和有较低的bax表达（1.03±0.27）,但宫内缺血后模型组bax升高（1.54±0.17）,bcl-2降低（0.26±0.06）。模型组脑组织bcl-2与正常组比较,P＜0.05,差异有显著性;针刺组与模型组比较,P＜0.01,差异有显著性。模型组bax蛋白与正常组比较,P＜0.05,差异有显著性;针刺组与模型组比较,P＜0.05,差异有显著性。4.针剌对HE病理形态学的影响正常对照组皮层脑细胞结构正常,胞核清晰,胞浆丰富,间质无水肿表现,海马锥体细胞2～3层,排列紧密,细胞核圆而大,核仁清晰。模型组大脑皮质和海马神经细胞丢失、变性最严重,而针刺组虽然仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少,零星可见一些损伤细胞,海马锥体细胞层细胞形态、排列基本正常。结论:1.针刺疗法可提高宫内缺血缺氧脑损伤大鼠的学习记忆能力（Y迷宫）、平衡能力（悬吊实验）、反应能力（斜坡实验）。2.宫内一过性缺血缺氧后确实会引起胎儿脑组织神经细胞细胞凋亡,而针刺疗法可以抑制宫内缺血缺氧后引起的神经细胞凋亡。3.宫内缺血刺激能引起胎鼠bax蛋白的表达,针刺可以提高宫内窘迫脑损伤大鼠脑组织Bcl-2的表达,降低Bax的表达,从而抑制宫内缺血缺氧后神经细胞凋亡。4.模型组可能与脑组织缺血神经细胞功能减退或过早凋亡所致,而针刺组学习记忆能力较模型组提高,可能与针灸刺激保护神经细胞有关。
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