论文摘要
第一部分Treg/Th17平衡失调与肝移植急性排斥反应发生发展的关系研究目的：通过检测肝移植术后急性排异患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和Th17细胞频率,探讨Treg/Th17比例失衡与急性排异反应发生的关系,以期进一步阐明急性排异反应的发生机制,为其诊断和治疗提供依据。方法：本临床研究自2008年6月至2012年12月期间对76例在中南大学湘雅二院移植科和首都医科大学附属北京朝阳医院肝胆外科的良性终末期肝病的患者行原位肝移植术,常规术后随访。所有患者肝移植手术前常规检测外周血CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T细胞百分比和CD4+IL-17+T细胞占CD4+T细胞百分比。出院后一年内定期（间隔3-6月）复查外周血CD4+CD25+FoxP3+T细胞和CD4+IL-17+T细胞水平,检测时患者肝功能良好,无合并感染及新发恶性肿瘤。患者发生急性排斥反应时,在治疗前抽血检测外周血CD4+CD25+FoxP3+T细胞和CD4+IL-17+T细胞水平同时行肝脏穿刺活检,治疗缓解后（3-6月）复查CD4+CD25+FoxP3+T细胞和CD4+IL-17+T细胞的变化。结果：排斥组患者发生急性排斥反应时外周血中CD4+CD25+FoxP3+T细胞的百分比与无排斥反应组（P<0.01）相比明显下降,其百分比与RAI呈负相关（r=-0.80,P<0.01）。与无排斥反应组及健康对照组相比,外周血CD4+IL-17+T细胞占CD4+T细胞的的百分比明显升高（P<0.001）,且与RAI呈正相关（r=0.79,P=0.0002）。结论：（1）通过对肝移植患者外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的动态观察和分析,有助于对肝移植患者术后预防排斥反应的发生。（2）在肝移植受者发生急性排斥反应时,外周血中升高的Th17细胞可能成为诊断急性排斥反应和评估急性排斥反应严重程度的监测指标。第二部分肝移植受者外周血调节性T细胞中CD39的表达及免疫抑制功能的研究目的：通过检测肝移植术后急性排异患者外周血中CD39在CD4+Treg表达与其免疫抑制功能的变化,研究CD39+Treg在抑制移植后排斥反应中的作用。方法：自2008年6月至2012年12月期间对76例在中南大学湘雅二院移植科和首都医科大学附属北京朝阳医院肝胆外科的良性终末期肝病的患者行原位肝移植术,常规术后随访。所有患者肝移植出院后一年内定期（间隔3-6月）复查外周血CD4+CD25+CD39+T细胞占CD4+CD25+T细胞百分比,同时检测CD4+CD25+39+T细胞中FoxP3的百分比,CD4+CD25+39+T细胞占CD4+CD25+T细胞百分比,同时检测CD4+CD25+73+T细胞中FoxP3的百分比。检测时患者肝功能良好,无合并感染及新发恶性肿瘤。急性排斥反应时,在治疗前抽血检测外周血CD4+CD25+39+T细胞和CD4+CD25+73+T细胞水平同时行肝脏穿刺活检,治疗缓解后（3-6月）复查。结果：肝移植术后,急性排斥反应组与无排斥反应组及健康对照组相比,外周血中CD4+CD25+CD39+占CD4+CD25+T细胞的百分比明显降低（P=0.01）；与健康对照组相比也明显降低（P=0.0002）;无排斥反应组与健康对照组相比外周血中CD4+CD25+CD39+占CD4+CD25+T细胞的百分比明显降低（P=0.001）。发生急性排斥反应时外周血中CD39+占CD4+CD25+T细胞的百分比与RAI呈正相关（r=-0.86,P<0.0001）。外周血CD4+CD25+CD39+Treg细胞抑制率48.8±9.1%,较无排斥反应组77.6±7.4%明显降低（P<0.0001）。在排斥组中,外周血中CD4+CD25+CD39+占CD4+CD25+T细胞的百分比与外周血CD4+IL-17+T细胞占CD4+T细胞的百分比显著的负相关（r=-0.74P=0.0007）。结论：（1）外周血CD4+CD25+CD39+Treg细胞在成人肝移植急性排斥反应过程中明显降低且与急性排斥反应的严重程度呈负相关。（2）发生急性排斥反应患者外周血CD4+CD25+CD39+Treg细胞抑制率较无排斥反应患者和健康对照组明显降低。（3）发生急性排斥反应患者外周血CD4+CD25+CD39+T细胞占CD4+T细胞百分比与外周血CD4+IL-17+T细胞占CD4+T细胞的百分比显著的负相关