沙利度胺治疗多发性骨髓瘤的临床与实验研究

论文摘要

第一部分沙利度胺方案治疗多发性骨髓瘤110例的临床研究目的探讨含沙利度胺方案治疗国人多发性骨髓瘤（MM）的有效率（RR）、无进展生存时间（PFS）和总生存时间（OS）以及与之相关的预后因素。方法回顾分析我院110例接受沙利度胺治疗的多发性骨髓瘤患者的临床和随访资料。RR的比较采用x2检验,生存分析采用Kaplan-Meier法,组间比较采用Log-rank检验,多因素分析采用Cox模型。结果接受沙利度胺单药治疗组5例,沙利度胺联合地塞米松组55例,沙利度胺联合化疗组50例,治疗总RR为63.6%,其中完全缓解（CR）7例（6.4%）,部分缓解（PR）63例（57.3%）。年龄＜65岁、诊断至开始沙利度胺治疗的时间短于6个月和采用联合治疗的患者RR更高（P＜0.05）。单因素分析,年龄＜65岁的患者PFS更长（P=0.008）;年龄＜65岁、血清肌酐（Cr）＜176.8μmol/L、β2微球蛋白（β2MG）＜3.5mg/L的患者具有更长的OS（P值分别为0.028、0.045和0.019）。多因素分析,β2MG为影响OS的唯一的独立预后因素（P=0.025）。常见的不良反应有便秘（38.2%）、嗜睡（33.6%）、水肿（31.8%）和肢体麻木（29%）,但绝大多数患者均能耐受,少见且严重的不良反应有心动过缓（2.7%）、深静脉血栓（1.8%）和精神异常（0.9%）。结论沙利度胺治疗国人MM具有肯定的疗效,毒副作用可以耐受;年龄、开始治疗时间和治疗方案影响短期疗效,年龄同时与治疗后PFS相关,而年龄、Cr和β2MG水平与患者的长期生存相关,β2MG为影响OS的独立预后因素。第二部分CYP2C19基因多态性对沙利度胺治疗多发性骨髓瘤疗效的影响目的研究人体内参与沙利度胺代谢的CYP2C19基因多态性在多发性骨髓瘤（MM）患者中的分布以及对含沙利度胺方案治疗MM疗效的影响,探讨抗血管生成在MM治疗中的作用。方法采用PCR-RFLP检测92例MM患者的CYP2C19基因型,观察弱代谢型（PM）在中国人MM中的发生率,并比较强代谢型（EM）和PM患者经沙利度胺治疗后的有效率。结果92例MM患者中PM18例（19.5%）,与健康汉族人中PM的发生率相当;EM和PM患者治疗后的有效率分别为62.6%和33.3%,差异具有统计学意义（P＜0.05）;按治疗方案分组后,沙利度胺联合地塞米松组中EM和PM有效率分别为60.8%和27.3%,差异具有统计学意义（P＜0.05）;沙利度胺联合传统化疗组EM有效率（65.2%）高于PM（42.7%）,但差异无统计学意义。结论CYP2C19基因多态性与MM的发生无明显相关性,但影响沙利度胺的药效,PM患者有效率较低,可能与沙利度胺抗血管生成作用减弱有关。第三部分细胞色素酶CYP2C19介导的沙利度胺体外抗骨髓瘤作用研究目的研究人肝微粒体代谢对沙利度胺体外抗骨髓瘤作用的影响,并探讨细胞色素酶CYP2C19在其中发挥的作用。方法沙利度胺原药或与人肝微粒体在体外温孵后分别处理多发性骨髓瘤（MM）细胞株U266、NCI-H929、RPMI 8226、LP-1和CZ-1,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡。结果沙利度胺原药对MM细胞活力无明显抑制作用,但与人肝微粒体温孵后明显抑制MM细胞活力。100μg/ml沙利度胺与人肝微粒体温孵后对5株MM细胞活力抑制率达34.9%～46.3%,凋亡细胞的比例增加达18.5%～32.5%。在温孵体系中加入CYP2C19特异性抑制剂奥美拉唑后,沙利度胺与人肝微粒体温孵后对MM细胞活力的抑制作用减弱,5μmol/L和10μmol/L奥美拉唑对100μg/ml沙利度胺经肝微粒体温孵后抑制细胞活力的逆转率分别为7.5%～21.9%和19.1%～38.3%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论沙利度胺的体外抗骨髓瘤作用需要人肝脏代谢,细胞色素酶系中的CYP2C19可能参与了这一过程。第四部分细胞色素酶CYP2C19介导的沙利度胺体外抗血管生成作用的研究目的研究人肝微粒体代谢对沙利度胺体外抗血管生成的影响,并探讨细胞色素酶CYP2C19在其中发挥的作用。方法沙利度胺原药或与人肝微粒体在体外温孵代谢后分别处理人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡,改良的Boyden小室法检测细胞迁移,体外小管形成实验检测HUVEC分化。结果沙利度胺原药对HUVEC细胞活力无明显抑制作用,细胞凋亡比例也无明显增加,轻度影响细胞迁移,无抗小管形成作用;当与人肝细胞微粒体温孵后HUVEC细胞活力明显抑制。100μg/ml沙利度胺与肝细胞微粒体温孵后对HUVEC细胞活力抑制率达（11.7±3.9）%,凋亡细胞增加达27.2%,明显下调细胞迁移力并抑制体外小管形成。在共孵体系中加入CYP2C19特异性抑制剂奥美拉唑后,可减弱沙利度胺抑制HUVEC细胞增殖活力和诱导凋亡的作用,减低细胞迁移力和部分逆转抗小管形成的作用。结论沙利度胺的体外抗血管生成作用需要人肝脏代谢活化,细胞色素酶系中的CYP2C19至少部分地参与了这一过程。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 中英文缩略词
• 前言
• 第一部分 沙利度胺方案治疗多发性骨髓瘤110例的临床研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 CYP2C19基因多态性对沙利度胺治疗多发性骨髓瘤疗效的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第三部分 细胞色素酶CYP2C19介导的沙利度胺体外抗骨髓瘤作用的研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第四部分 细胞色素酶CYP2C19介导的沙利度胺体外抗血管生成作用的研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 小结
• 综述一
• 综述二
• 已刊、待发表论文
• 致谢