本文主要研究内容
作者何扩,张秀媛,王云峰,赵瑞平,李育峰（2019）在《抗甲硝唑单链抗体融合蛋白的表达及其ELISA检测方法建立》一文中研究指出：为实现甲硝唑单链抗体(single-chain variable fragment,scFv)在大肠杆菌中的可溶性表达,以甲硝唑抗体可变区基因(VH、VL)为模板,扩增甲硝唑的scFv基因,scFv双酶切后与PLIP6/GN载体重组,构建重组质粒PLIP6/GNscFv,转化大肠杆菌JM109,阳性克隆转大肠杆菌BL21经温度诱导表达重组单链抗体,并通过聚丙酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对其鉴定。采用竞争酶联免疫(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测重组单链抗体的抗原结合活性。结果表明诱导表达的scFv分子量接近33 kDa,能够特异性识别兽药甲硝唑,半抑制率(IC50)为(0.72±0.04)ng/mL。选择虾样品进行添加回收试验,建立的方法检测其回收率在88.54%到113.27%之间。这说明成功构建重组质粒PLIP6/GN-scFv并实现可溶性表达并可用于实际样品检测。
Abstract
wei shi xian jia xiao zuo chan lian kang ti (single-chain variable fragment,scFv)zai da chang gan jun zhong de ke rong xing biao da ,yi jia xiao zuo kang ti ke bian ou ji yin (VH、VL)wei mo ban ,kuo zeng jia xiao zuo de scFvji yin ,scFvshuang mei qie hou yu PLIP6/GNzai ti chong zu ,gou jian chong zu zhi li PLIP6/GNscFv,zhuai hua da chang gan jun JM109,yang xing ke long zhuai da chang gan jun BL21jing wen du you dao biao da chong zu chan lian kang ti ,bing tong guo ju bing xian an ning jiao dian yong (sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)dui ji jian ding 。cai yong jing zheng mei lian mian yi (enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)jian ce chong zu chan lian kang ti de kang yuan jie ge huo xing 。jie guo biao ming you dao biao da de scFvfen zi liang jie jin 33 kDa,neng gou te yi xing shi bie shou yao jia xiao zuo ,ban yi zhi lv (IC50)wei (0.72±0.04)ng/mL。shua ze ha yang pin jin hang tian jia hui shou shi yan ,jian li de fang fa jian ce ji hui shou lv zai 88.54%dao 113.27%zhi jian 。zhe shui ming cheng gong gou jian chong zu zhi li PLIP6/GN-scFvbing shi xian ke rong xing biao da bing ke yong yu shi ji yang pin jian ce 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自食品研究与开发的何扩,张秀媛,王云峰,赵瑞平,李育峰，发表于刊物食品研究与开发2019年09期论文，是一篇关于甲硝唑论文,单链抗体论文,融合蛋白论文,诱导表达论文,酶联免疫吸附论文,食品研究与开发2019年09期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自食品研究与开发2019年09期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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