不同浓度骨碎补提取液对兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响

不同浓度骨碎补提取液对兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响

论文摘要

目的:观察不同浓度的骨碎补醇提取液对于兔骨髓基质细胞增殖和向成骨细胞方向分化的影响。方法:用不同浓度的骨碎补醇提液对骨髓基质细胞持续培养,通过倒置相差显微镜、组织化学染色等手段对所培养细胞进行形态学和组织学观察,并采用MTT 法对细胞的生长曲线进行测量,与标准培养液的细胞进行对比研究。结果:高浓度的药物对骨髓基质细胞产生了有害影响。含中、低浓度的药物所培养的部分细胞,在体外逐渐增殖、转化; 组织学鉴定显示碱性磷酸酶染色呈阳性,阳性率均在30%以上,并能大量分泌Ⅰ型胶原; 同空白对照组细胞比较,从碱性磷酸酶染色阳性细胞数、Ⅰ型胶原表达能力来看,中浓度、低浓度的中药组之间无明显差异,但是从MTT的结果分析,低浓度组促进细胞增殖的作用较中浓度组强。结论:中药骨碎补的醇提取液能促进骨髓基质细胞的增殖和向成骨细胞方向的分化,不同浓度之间的作用不尽相同。骨碎补对骨髓基质细胞的这种作用可能是其促进骨折愈合、预防治疗骨质疏松的一种细胞学机制。

论文目录

  • 引言
  • 材料与方法
  • 一、实验材料
  • (一) 主要设备及仪器
  • (二) 主要试剂
  • (三) 实验动物
  • 二、骨碎补醇提液的提取过程
  • 三、培养液的配制
  • 四、骨髓基质细胞的原代培养
  • 五、骨髓基质细胞的传代培养
  • 六、实验分组和寻找骨碎补提取液浓度的基准
  • 七、组织形态学观察
  • (一) 倒置相差显微镜逐日观察
  • (二) HE 染色具体步骤
  • 八、生长曲线测定
  • 九、细胞表型鉴定
  • (一) 碱性磷酸酶染色
  • (二) Ⅰ型胶原免疫组织化学染色
  • 十、统计学方法
  • 实验结果
  • 一、倒置相差显微镜观察结果
  • 二、HE 染色的结果:见附录
  • 三、MTT 法测定结果(见表1),并绘制成曲线图(见图1)
  • 四、碱性磷酸酶染色结果
  • 五、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色结果
  • 讨论
  • 一、对骨髓基质细胞的认识
  • 二、祖国医学对骨髓与骨关系的认识及其与现代医学的相融性
  • 三、对骨碎补的现代药理研究
  • 四、本实验中不同浓度的骨碎补醇提液对骨髓基质细胞增殖及成骨分化的影响
  • 结语
  • 参考文献
  • 综述
  • 附录
  • 致谢
  • 详细摘要
  • 相关论文文献

    • [1].骨碎补提取液培养BMSCs移植对模型大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响[J]. 山东中医杂志 2013(09)
    • [2].骨碎补提取物对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化及Cbfα1表达的影响[J]. 山东医药 2013(25)
    • [3].不同浓度骨碎补提取液对体外培养人牙髓细胞增殖及超微结构的影响(英文)[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2009(02)
    • [4].水煎煮法提取骨碎补总黄酮的动力学模型适应性研究[J]. 北京中医药大学学报 2014(02)
    • [5].骨碎补化学成分和药理作用研究进展[J]. 解放军药学学报 2012(05)
    • [6].骨碎补提取液及柚皮甙对小鼠成骨细胞MC3T3-E1基质矿化作用影响的比较研究[J]. 口腔医学 2009(08)

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