(厦门医学院福建厦门361023)
摘要:病理诊断是现代医学中疾病诊断的重要标准,诊断结果的准确性受到多种因素的影响,例如病理医生的技术水平、处理质量及切片染色效果等。但是从实际的病理技术的具体应用情况来看,操作过程中还有许多问题需要解决,例如标本固定的时间不合理会直接导致组织脱水不彻底,从而影响制片的质量。因此,为了提高病理诊断的临床效果及准确性,医院病理科必须要加强对病理技术的改革,调整HE染色的操作流程。本文首先介绍病理技术应用的现状,然后详细阐述病理技术HE染色的具体应用方法,最后讨论病理技术HE染色在病理诊断中的应用价值。
关键词:病理技术;HE染色;病理诊断;价值
病理诊断是现代医学上最为权威的一种临床诊断方法,也是临床上首选的一种诊断方式,但是这种诊断方式的准确性很容易受到一些外界因素的影响,尤其是在病理检查的各项工作过程中,会受到取材操作、质量、时间等相关因素的影响,组织和细胞的HE染色质量会跟着受影响,制片质量也会受损害。因此,为了避免组织结构发生改变,在临床组织染色的过程中要按照标本的具体类型,选取相应的诊断工具和方法;另外,还要保障组织的形态和活体成分在进入病理科制片期间不发生自溶情况,以减少对制片质量的影响[1]。HE染色技术是一种重要的病理诊断技术,在病理检查过程中不仅可以有效提高切片质量,还能够提高临床诊断的准确性,为临床诊断提供重要依据。本文对病理技术HE染色在病理诊断中的应用价值进行了分析,详细如下。
一、病理技术应用现状
近年来病理技术逐渐成为医学界最具权威的病理诊断方式,临床诊断的结果准确程度与病理医师专业程度、组织病理片处理以及染色效果紧密相关。由于人们自我保护意识的不断提高、法律知识的日渐普及,使得病理诊断风险呈逐日上升趋势。在病理技术教学直至应用的整个过程中,由于受到诸多因素影响,病理诊断往往没有得到充分重视。针对这一现状,为了确保病理诊断应用价值最大程度的发挥,要求在学校必须树立起检测意识和责任心,提高技术讲解水平,提供更加优质的病理切片,为病理技术熟练应用提供基础条件。病理技术教育工作目前存在着诸多问题,主要包括:标本固定的时间欠缺、试剂使用阶段浓度变化以及组织脱水不够彻底等,降低了病理切片质量,造成技术实践准确程度无法得到保障。因此,我校随机抽取2015年1月至2015年12月九百六十八例快速冰冻、石蜡切片,五百一十例脱落细胞检查,收集检测阶段问题,针对性解决技术应用的局限。不断调整病理组织选材、脱水、固定、切片以及HE染色等工作,确保技术应用实践的准确程度。
二、病理技术HE染色应用方法
(一)HE染色
HE染色作为苏木精伊红染色技术,是石蜡切片各项内容中应用最广泛的方法,其核心是苏木精的染色液。苏木精本质上是自然染料,虽然本身并没有染色能力,但是通过化学氧化之后变成了苏木红,实现染色的要求。苏木精对细胞的亲和力相对较低,借助染剂的催化可满足染色效果。基于碱性环境内,苏木红显色主要呈蓝色。伊红主要属于酸性的染料范畴,可以将细胞质和细胞的外基质着色成为红色。通常情况下,病理切片的组织变化与组织产物都可以采用HE染色技术显示。针对质量较好HE染色板,一般形态的细胞和组织能够采用显微镜进行观察[2]。
(二)染色方法
病理诊断在组织切片实际制作的材料选择中,必须结合不同组织,选择合适的差异性固定时间、纸片染色的方式以及脱水时间等。学校内主要采用全部器官或部分器官切除、大块组织的切除标本以及多种细胞学标本,重点检查血液标本和体液,病理诊断实际取材环节需要做到完整、迅速、准确和具备代表性。HE染色技术操作流程包括:首先,细胞涂片需要去潮风干之后固定于百分之九十五浓度的乙醇液剂内浸泡十五分钟。通过显微镜观察已经完成固定的切片,选定切面免疫染色范围,并运用签字笔在切片背面的载玻片进行标记,准确显现出需要染色抗体区域。其次,按照标准顺序在细胞涂片经过纯净水、二甲苯以及梯度乙醇溶液,将涂片盖玻片和树胶完全洗脱。再次,加入百分之零点五的盐酸乙醇,清洗苏木红颜色。此外,采用纯净水展开冲洗,适当加入完成稀释的氨水,将伊红颜色完全脱掉。对单独浸泡在水中的载玻片,反复进行洗涤。用DPX或者树胶加盖封片并且粘贴标签。最后,按照显微镜观察到的细胞形式展开合理调整,综合性分析染色具体步骤的时间、受到温度以及切片厚度等内容。各种染料的试剂多数为化学纯,完成染色之后运用显微镜系统检查染色结果,仔细核对标本号码、数量以及种类,确保切片实际质量[3]。
病理技术通过把大小标本分开固定、染色以及脱水,苏木精可以将细胞核逐渐染成更加鲜明的蓝色,骨组织内黏液质染成灰蓝色、骨组织染成深蓝色。呈现结果的报告鲜明,各类切片组织在显微镜内仔细观察,确保HE染色的结果能够达到技术诊断应用的规定标准。
三、价值讨论
结合学校资料进行分析,病理诊断针对组织细胞选材、脱水以及切片质量直接影响病理技术HE染色结果,组织切片的染色质量决定了病理切片诊断的结果。由于不明确的诊断结果会影响疾病临床治疗效果,所以,必须严格按照不同标本匹配差异性取材方法(主要包括取材标本范围、标本取材的方式)进行诊断。
HE染色阶段中影响染色效果最为核心的因素主要是细胞核着色,通过物理和化学方式共同作用下完成这项工作。一方面,因为细胞组织内部具有诸多微小细孔,在染料渗透之后和组织结合,细胞吸收染料逐渐溶解和扩散,完成组织切片固定。另一方面,细胞组织内部有着碱性和酸性物质,针对含有酸性物质能够和染色液剂部分的阳离子结合,进而生成了固定分子。染色液剂阴离子和含有部分碱性物质进行结合,共同发挥牢固性作用。切片固定主要目的是确保细胞和组织维持活体情况相似成分和形态,进而降低切片制作阶段组织发生自溶而造成原有组织构造被破坏或消失的机率。固定切片后需要及时送检,降低由于组织固定的时间较长而导致组织变硬和变脆的概率,以防影响切片整体效果和诊断结果。病理技术HE染色阶段需要注意使用试剂浓度的变化情况,适当控制湿度和温度,提高切片质量,最大程度上发挥其应用价值[4]。
总而言之,不断增强HE染色技术的应用能力,通过不同固定、切片以及脱水方法,保障组织切片质量,显著性提高病理诊断准确程度和可靠程度。基于代表性诊断结果,可以极大程度上增强疾病临床诊治的效果,为学习提供更加准确的病理信息和资料。所以,HE染色在病理诊断和实际治疗阶段均发挥着不可或缺的作用。作为现代化检测手段,对比应用实际效果,为学校学习和实际应用提供指导依据,具有极高的应用价值。
参考文献
[1]杨文英.病理技术HE染色在病理诊断中的应用研究[J].大家健康(学术版),2014,8(10):50-51.
[2]董星杏.病理技术HE染色在病理诊断中的应用探讨[J].世界最新医学信息文摘,2016,16(34):43-44.
[3]王娟玲.病理技术HE染色在病理诊断中价值的分析[J].临床医药文献电子杂志,2017,4(37):7273.
[4]段成兵.探讨病理技术HE染色在病理诊断中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2017,17(16):148.