云南玄参主要真菌病害病原菌鉴定及生物学特性研究

云南玄参主要真菌病害病原菌鉴定及生物学特性研究

论文摘要

玄参(Scrophularia ningpoensis Heinsl.)为玄参科(Scrophulariaceae)多年生深根性草本植物。以干燥的根入药,是我国传统中药,应用历史悠久,久负盛名。云南玄参因其品质好、总产高而享誉国内外。近年来,随着本省玄参种植面积逐年增加,病害亦逐年加重,且渐渐成为产量和品质的制约因子。因此,开展云南玄参主要病害病原菌的鉴定、生物学特性及化学和生物药剂对病原菌抑菌作用的初步研究,对制定病害防治对策有重要意义。利用传统的形态学,结合rDNA-ITS序列的测定,鉴定了云南玄参主要病害的病原菌,认为玄参茎枯病的病原为草茎点霉菌(Phoma herarum Westendorp),这是草茎点霉引起玄参茎枯病的首次报道。玄参炭疽病的病原菌为褐炭疽菌(Colletotrichum fuscum Laub)和辣椒炭疽菌[Colletotrichum capsici(Syd.) Bult & Bisby],将文献报道的玄参炭疽病病原菌更加明确。玄参白绢病的病原菌为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.),该病是一种常见玄参病害。本研究明确了不同培养基、温度、pH值、碳源及氮源对玄参茎枯病、炭疽病及白绢病病原菌菌丝生长、产孢以及分生孢子和菌核萌发的影响:1)草茎点霉菌菌丝生长的最适温度为28℃,pH值为6~8,培养基为PSA,碳源为葡萄糖,氮源为酵母粉;该菌产孢最适温度为28℃, pH值为7,培养基为OMA,碳源为甘油,氮源为谷氨酸;该菌孢子萌发最适温度为25℃,pH值为6~8;碳源为乳糖和蔗糖,氮源为酵母粉。2)褐炭疽菌菌丝生长最适温度为30℃,pH值为5~6,培养基为OMA,碳源为淀粉,氮源为酵母粉;该菌产孢最适温度为30℃,pH值为8,培养基为PSA,碳源为麦芽糖,氮源为蛋白胨;孢子萌发的最适温度25℃,pH值为5,葡萄糖和酵母粉最好。3)辣椒疽菌菌丝生长最适温度为30℃,pH值为7,培养基为PDA,碳源为山梨醇和麦芽糖,氮源为酵母粉;该菌产孢最适温度为28℃~30℃,pH值为6,培养基为OMA,碳源为麦芽糖,氮源为缬氨酸;孢子萌发最适温度为20℃~28℃,pH值为5,碳源为乳糖、麦芽糖,氮源为蛋白胨和缬氨酸。4)齐整小核菌菌丝生长最适温度为30℃,pH值为6,碳源为山梨醇和淀粉,氮源为蛋白胨;菌核萌发的最适温度为35℃,蔗糖和酵母粉最好,萌发的适宜pH值是2~7。不同药剂的室内毒力测试的结果表明40%的福星有很好的抑菌作用;生防细菌枯草芽孢杆菌XF-1对草茎点霉菌、褐炭疽菌和辣椒炭疽菌较好的抑制作用,但对齐整小核菌无效;生防真菌哈茨木霉Th-B对草茎点霉菌、褐炭疽菌、辣椒炭疽、齐整小核菌均有抑制作用。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 文献综述
  • 1.1 玄参的重要性及价值
  • 1.2 玄参的分布、植物形态及生物学特性
  • 1.3 玄参的病害研究
  • 1.3.1 玄参斑点病
  • 1.3.2 玄参斑枯病
  • 1.3.3 玄参白绢病
  • 1.3.4 玄参轮纹病
  • 1.3.5 玄参炭疽病
  • 1.4 病原菌的生物学特性
  • 1.5 杀菌剂生物测定概况
  • 1.6 病害的生物防治
  • 1.7 分子生物学技术在真菌鉴定中的应用
  • 1.8 本研究的目的、意义和内容
  • 2 材料与方法
  • 2.1 玄参主要病害样本采集、病原菌分离及鉴定
  • 2.1.1 玄参主要病害病株采集取样
  • 2.1.2 玄参主要病害的症状观察
  • 2.1.3 病原菌的分离培养
  • 2.1.4 分离菌株的单孢纯化
  • 2.1.5 病原菌致病性测定
  • 2.1.6 病原菌的形态描述及鉴定
  • 2.1.7 病原菌rDNA-ITS 的扩增与序列分析
  • 2.2 病原菌生物学特性
  • 2.2.1 供试病原菌
  • 2.2.2 玄参茎枯病和两种炭疽病病原菌生物学特性的研究
  • 2.2.3 玄参白绢病病原菌生物学特性的研究
  • 2.3 杀菌剂室内毒力测定
  • 2.3.1 供试病原菌
  • 2.3.2 供试药剂
  • 2.3.3 毒力测定方法
  • 2.3.4 统计方法
  • 2.4 生防菌株对病原菌的抑菌作用
  • 2.4.1 供试生防菌株
  • 2.4.2 供试病原菌
  • 2.4.3 抑菌试验的方法
  • 3 结果与分析
  • 3.1 玄参主要病害的危害、症状、病原菌分离及鉴定结果
  • 3.1.1 玄参茎枯病
  • 3.1.2 玄参炭疽病
  • 3.1.3 玄参白绢病
  • 3.2 病原菌生物学特性
  • 3.2.1 玄参茎枯病和两种炭疽病病原菌的生物学特性
  • 3.2.2 玄参白绢病病原菌的生物学特性
  • 3.3 杀菌剂室内毒力测定结果
  • 3.4 生防菌株对病原菌的抑菌作用
  • 3.4.1 木霉Th-B
  • 3.4.2 枯草芽孢杆菌XF-1
  • 4 讨论
  • 4.1 玄参茎枯病
  • 4.1.1 玄参茎枯病的鉴定
  • 4.1.2 玄参茎枯病病原菌生物学特性
  • 4.2 玄参炭疽病
  • 4.2.1 玄参炭疽病的鉴定
  • 4.2.2 玄参炭疽病病原菌生物学特性
  • 4.3 玄参白绢病
  • 4.3.1 玄参白绢病病原菌形态学
  • 4.3.2 玄参白绢病病原菌的生物学特性
  • 4.4 杀菌剂和生防菌对玄参茎枯病、炭疽病和白绢病病原菌抑菌效果
  • 5 结论
  • 5.1 云南玄参主要病害的危害
  • 5.2 云南玄参主要病害的病原
  • 5.3 草茎点霉菌、褐炭疽菌、辣椒炭疽菌和齐整小核菌4 种病原菌生物学特性研究
  • 5.4 杀菌剂和生防菌对草茎点霉菌、褐炭疽菌、辣椒炭疽菌和齐整小核菌的抑菌效果
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录
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