补肾中药对卵母细胞ras蛋白活性影响的研究

论文摘要

目的:通过实验与临床研究观察二至天癸颗粒对卵细胞质量的影响,从分子、基因水平进一步探讨其作用机理。方法:实验研究:60只小鼠分为4组, 1组（二至天癸颗粒配合人绝经期促性腺激素（HMG）组）、2组（二至天癸颗粒组）、3组（六味地黄颗粒配合HMG组）、4组（HMG组）,对4组进行排卵试验和卵裂试验,以免疫组织化学（SABC）法测定卵细胞内Ras蛋白表达;同时观察二至天癸颗粒对卵细胞质量的影响。临床研究:60例IVF-ET治疗患者随机分为试验组（二至天癸颗粒合IVF-ET常规用药组控制性超促排卵（COH））30例和对照组（六味地黄颗粒合IVF-ET常规用药组控制性超促排卵（COH））30例。观察患者取卵日肾气阴两虚证候较垂体降调节后的改善情况,测定注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）日血清雌二醇（E2）水平,比较两组取卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率的差异。结果:实验研究表明:①二至天癸颗粒配合HMG组、六味地黄颗粒配合HMG组与HMG组在促排卵疗效上无显著性差异（P>0.05）,但是在卵细胞形态学评分及受精率、卵裂率中比较有显著性差异（P<0.05）②正常卵细胞的Ras蛋白表达高于异常卵细胞,（P<0.01）③二至天癸颗粒配合HMG组与二至天癸颗粒组正常卵细胞的Ras蛋白表达明显高于六味地黄颗粒配合HMG组、HMG组,（P<0.05）。临床研究表明试验组注射HCG日血清雌二醇（E2）水平显著高于对照组（P<0.05）,试验组肾虚证候改善、优质卵率、受精率、卵裂率显著高于对照组（P<0.05）。结论:二至天癸颗粒能增强卵细胞Ras蛋白的表达,该药提高卵细胞质量的机理可能与胰岛素样生长因子（IGF）系统下Ras蛋白的高表达有关。该颗粒具有缓解降调节后肾气阴两虚症状,调节激素水平,提高优质卵率与受精率等作用。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 实验研究
• 1 实验材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物与试剂
• 1.3 实验仪器
• 1.4 药物剂量
• 1.5 小鼠喂养方法及分组
• 2 实验方法
• 2.1 生物技术方面
• 2.2 基础实验---免疫组化
• 2.3 统计学方法
• 2.4 卵细胞形态学（成熟度）观察
• 3 实验结果
• 3.1 各组小鼠获卵数目比较（见表1）
• 3.2 各组小鼠卵细胞形态学比较（见表2）
• 3.3 RAS 蛋白在不同卵细胞中的表达（见表3）
• 3.4 各组小鼠正常卵母细胞RAS 蛋白表达量比较（见表4）
• 3.5 各组受精和卵裂能力的观察（见表5、表6）
• 临床研究
• 1 研究对象
• 1.1 病例来源
• 1.2 诊断标准
• 1.3 病例选择标准
• 1.4 临床病例分组
• 1.5 IVF-ET 周期前病人准备
• 2 一般资料
• 2.1 两组病人年龄、病程比较（见表1）
• 2.2 两组病人病史比较（见表2）
• 2.3 两组病人自然月经周期第三天基础内分泌水平（见表3）
• 2.4 两组病人垂体降调节后肾气阴两虚证候积分（见表4）
• 2.5 两组病人垂体降调节后基础激素水平（见表5）
• 3 材料与方法
• 3.1 材料与设备
• 3.2 方法与步骤
• 3.3 观察指标
• 3.4 统计方法
• 4 结果
• 4.1 两组病人治疗前后肾气阴两虚证候积分变化比较（见表6）
• 4.2 两组病人HCG 日内分泌比较（见表7）
• 4.3 两组病人优质卵率、受精率、优质胚胎率比较（见表8）
• 4.4 两组病人妊娠率比较（见表9）
• 讨论
• 1 卵细胞发育的生理基础
• 1.1 祖国医学对卵泡发育的认识
• 1.2 现代医学对卵泡发育的研究
• 2 卵泡发育障碍的研究
• 2.1 祖国医学的认识
• 2.2 现代医学研究
• 3 IGF、RAS 蛋白与卵细胞
• 3.1 IGF 与卵细胞
• 3.2 IGF、RAS 蛋白与卵细胞
• 4 中医药在IVF-ET 控制性促排卵中的应用现状
• 5 二至天癸颗粒提高IVF-ET 周期卵细胞质量与临床疗效分析
• 5.1 二至天癸颗粒组方分析
• 5.2 二至天癸颗粒临床疗效分析
• 6 实验结果分析
• 6.1 对排卵数目及卵细胞形态学观察比较
• 6.2 补肾促卵细胞成熟与RAS 蛋白表达增强有关
• 7 超排卵方案中应注重补肾益精
• 结语
• 参考文献
• 综述
• 附图
• 致谢