论文摘要
目的:本实验利用天然产物多糖—酵母多糖,通过分离纯化,制备出不同分子量片段酵母多糖,并对所制样品进行体内CAG活性研究,判断样品的活性,研究推断纯化样品的构效关系。方法:首先采用水解、超滤和透析等方法分离纯化酵母葡聚糖;然后通过苯酚硫酸法、间羟基联苯法和BCA法蛋白定量试剂盒测定总糖、糖醛酸、蛋白质的含量;利用HPLC测定纯度及分子量分布;GC和高效液相PMP法测定组成糖;GC-MS测定糖苷链连接方式;最后使用CAG大鼠模型,对样品进行药效学研究,确定样品活性,推断纯化样品的构效关系。结果:得到2K、5K、8K三个分子量片段的酵母多糖,总糖含量分别为63.17%、75.5%、84.45%,蛋白质含量分别为9.84%、5.61%、1.14%,糖醛酸含量甚微。三个样品均由大量Glu和少量Man组成,以(1-3)-Glu为主链,还有少量(1-3)-Man和(1-6)-Glu。2K分子量片段的酵母多糖在(1-6)-Glu连接的4位上有支点,5K分子量片段的酵母多糖在(1-3)-Glu连接的6位和(1-6)-Glu连接的4位有分支点,8K分子量片段的酵母多糖在(1-3)-Glu连接的4、6位和(1-6)-Glu连接的4位均有分支点。三个样品对大鼠CAG模型均有一定的治疗活性,活性以8K分子量片段的酵母多糖对大鼠CAG模型有明显的改善作用,5K分子量片段和2K分子量片段的酵母多糖的活性相当。结论:从酵母多糖中分离得到2K、5K和8K三个分子量片断的酵母多糖。研究了不同结构、不同分子量片段的酵母多糖对大鼠CAG模型的构效关系,确定了8K分子量片段的酵母多糖对CAG有明显的改善作用。