超声定位辐照载药微泡对卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤生物学效应的实验研究

论文摘要

目的:观察低频超声定位辐照载紫杉醇脂质微泡（paclitaxel-carrying liposome microbubbles, PLM）对卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,并通过观察其抑瘤率及肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、微血管密度（MVD）和细胞核相关抗原（Ki-67）的变化,探讨超声联合PLM对SKOV3皮下移植瘤的生物学效应及可能的机制。为探索一种全新的靶向治疗卵巢恶性肿瘤的手段提供实验依据。方法:1.实验分组:建立卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤模型,并将成功建立模型的20只裸鼠随机分成4组,即实验Ⅰ组为PLM辐照组,实验Ⅱ组为紫杉醇药物治疗组,实验Ⅲ组为单纯PLM组和生理盐水对照组。每组5只分别给予不同的处理方法。2.处理方法:实验Ⅰ组:将PLM用生理盐水稀释,按紫杉醇5mg/kg的剂量每只裸鼠经尾静脉注入PLM 0.2ml（实际载药量约0.1mg）后,予超声探头辐照瘤组织区（输出功率0.5W/cm2,作用时间3min）;实验Ⅱ组:将紫杉醇注射液稀释为0.5mg/ml,按紫杉醇5mg/kg的剂量于裸鼠尾静脉注入0.2ml（药量0.1mg）;实验Ⅲ组为:同实验Ⅰ组方法稀释PLM,每只裸鼠经尾静脉注入PLM 0.2ml后,不予超声辐照;对照组则以生理盐水0.2ml注入每只裸鼠。各组上述处理每天1次,连续7天。3.观察指标:末次治疗后24h颈椎脱位处死裸鼠并计算抑瘤率（重量抑瘤率WIR和体积抑瘤率VIR）;透射电镜下观察肿瘤细胞超微结构的改变;用免疫组织化学SP法检测肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、微血管密度（MVD）和细胞核相关抗原（Ki-67）的表达,并采用北航CM2000B多功能真彩色病理图像分析系统对bFGF及Ki-67进行半定量分析,以面密度反映其阳性表达的阳性率（面密度=阳性目标面积/统计场面积）。结果:1.抑瘤率:对照组WIR为0,VIR为0;实验Ⅰ组WIR为55.41%,VIR为52.77%;实验Ⅱ组WIR为36.48%,VIR为28.06%;实验Ⅲ组WIR为5.45%,VIR为7.07%。2.bFGF表达的阳性率:对照组为0.29248±0.01062;实验Ⅰ组为0.19049±0.01099 ;实验Ⅱ组为0.23304±0.01819 ;实验Ⅲ组为0.27422±0.01342。3.MVD值:对照组为27.044±1.732;实验Ⅰ组为15.124±1.353;实验Ⅱ组为19.226±1.501;实验Ⅲ组为25.228±1.151。4.Ki-67表达的阳性率:对照组为0.30062±0.02032 ;实验Ⅰ组为0.15699±0.01317 ;实验Ⅱ组为0.23271±0.01424 ;实验Ⅲ组为0.28456±0.01588。5.与对照组比较,实验Ⅰ组及实验Ⅱ组对肿瘤的生长都有明显的抑制作用（WIR分别为55.41%和36.48%,VIR分别为52.77%和28.06%）（P<0.01）,而实验Ⅰ组的抑瘤率最高（P<0.01）;实验Ⅰ组及实验Ⅱ组肿瘤组织中bFGF、MVD及Ki-67的阳性表达量均下降（P<0.01）,以实验Ⅰ组下降最明显（P<0.01）。实验Ⅲ组与对照组在抑瘤率、bFGF、MVD及Ki-67的阳性表达量上无统计学意义（P>0.05）。结论:与单纯紫杉醇药物组相比,超声定位辐照PLM的方法对裸鼠SKOV3卵巢癌皮下移植瘤具有较强的体内抑瘤效应,可通过抑制肿瘤血管生成因子bFGF的合成,从而阻止肿瘤组织内微血管的形成,诱导肿瘤细胞的凋亡,直接或间接抑制肿瘤细胞的增殖活性而延缓肿瘤的生长。该方法有望成为卵巢恶性肿瘤靶向治疗的新途径。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：超声定位辐照载药微泡对卵巢癌SKOV3 裸鼠皮下移植瘤生物学效应的实验研究
• 前言
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 文献综述一
• 文献综述二
• 致谢
• 攻读硕士学位期间所完成的论文