人参皂苷Rg2对体外培养的大鼠海马缺氧神经元的预防保护作用

论文摘要

目的 采用体外培养海马神经元的方法,研究人参皂苷对缺氧大鼠海马神经元的预防保护作用。脑缺血是临床上常见的一种疾病,流行病学调查表明,脑卒中同肿瘤,心脏病一起成为疾病的三大死因,而且脑卒中发病后的幸存者中70%存在不同程度的残疾,给家庭、社会带来了沉重的负担。经典理论认为,中枢神经系统损伤后不能恢复,但随着科技手段和分子生物学的高速发展,许多学者证实,当给损伤的中枢神经提供适当的条件后中枢神经系统也是能够恢复的,从而使人们认识到对脑缺血的治疗和预防是可行的。本实验着重探讨:人参皂苷Rg2在脑缺血中的保护作用及机制,寻求预防和治疗脑缺血发生的药物。 方法 出生1～3天的新生Wister大鼠,分离双侧海马组织,消化,接种,培养。选用1014d的海马神经元,将不同剂量的人参皂苷Rg2及对照药物尼莫地平加入到培养液中,4小时后建立95%N2+5%CO2混合气体急性缺氧模型。台盼兰染色细胞计数法测定细胞活性;流式细胞仪测定细胞凋亡率;荧光分光光度计法测胞内[Ca2+]i含量:吉姆萨染色法从形态上观察凋亡情况并计数测凋亡率;DNA Ladder测定细胞凋亡程度及凋亡率以及酶法测定抗氧化酶（超氧化物岐化酶）的抗氧化能力及丙二醛、NO的含量。

论文目录

• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 药品与试剂
• 1.1.3 主要实验设备
• 1.1.4 主要试剂的配制
• 1.2 方法
• 1.2.1 培养皿的处理
• 1.2.2 海马神经元的培养
• 1.2.3台盼蓝染色
• 1.2.4 Nissl 染色鉴定神经元
• 1.2.5 分组及给药
• 1.2.6 缺氧模型的制备
• 1.2.7姬姆萨染色
• 1.2.8荧光分光光度计测
• 1.2.9海马神经元上清液中SOD、MDA、NO的测定
• 1.2.10海马神经元细胞凋亡率的检测
• 1.2.11琼脂糖凝胶电泳法
• 1.2.12统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 细胞存活率的计算
• 2.2神经元的鉴定
• 2.3姬姆萨染色
• 2+」i浓度'>2.4海马神经元内「Ca²⁺」i浓度
• 2对缺氧所致的海马神经元抗氧化酶活性及MDA、NO含量影响'>2.5人参皂昔Rg₂对缺氧所致的海马神经元抗氧化酶活性及MDA、NO含量影响
• 2.6流式细胞仪检测海马神经元凋亡率
• 2.7琼脂糖凝胶电泳法观察人参皂昔Rg:对缺氧海马神经元细胞亡凋情况的影响
• 第三章 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 致谢
• 文献综述
• 学位论文独创性声明
• 学位论文知识产权权属声明