南方红豆杉、榧树内生真菌的研究

论文摘要

植物内生真菌(Endophytic fungi)是指在某一时期生活在植物体内,但对寄主植物组织并不引起明显病害症状的真菌。由于长期生长于植物内部,往往能产生许多具有与共生植物相似的活性代谢产物。植物内生真菌作为一种新的微生物资源引起了人们广泛的关注,从内生真菌中寻找和发现新的活性化合物,如抗肿瘤、抗真菌等活性化合物是植物内生菌研究的一个热点。 本文主要以红豆杉科植物(红豆杉、榧树)为研究对象,研究其内生真菌多样性,同时寻找具有抗植物病原菌的活性菌株。 主要研究结果如下: 1、从来源于江西与浙江两地的南方红豆杉、榧树的针叶、茎、树皮中分离得到507株内生真菌,其中有289株菌株分别鉴定为下列13个属:拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sp.)55株(占总数10.8%)、拟茎点霉(Phomopsis sp.)43株(占总数8.5%)、镰孢霉(Fusarium sp.)43株(占总数8.5%)、链格孢(Alternaria sp.)34株(占总数6.7%)、炭疽菌(Colletotrichum sp.)30株(占总数5.9%)、木霉(Trichoderma sp.)20株(占总数3.9%)、茎点霉(phoma sp.)19株(占总数3.7%)、拟青霉(Paecilomyces sp.)15株(占总数3.0%)、炭角菌(Xylaria sp.)10株(占总数2.0%)、青霉(Penicillium sp.)9株(占总数1.8%)、曲霉(Aspergillus sp.)4株(占总数0.8%)、盘单毛孢(Monochaetia sp.)4株(占总数0.8%)、根霉(Rhizopus sp.)3株(占总数0.6%)。另有子囊菌(Ascomycete sp.)29株(占总数5.7%)。同时有189株(占总数37.3%)在培养中未见产孢,暂定为无孢菌群(Mycelia sterilia)。结果表明不同的植物来源、同一植物的不同部位其内生真菌的数量、种群分布等都有明显差异:①南方红豆杉中共分离到407株菌株(占总数的80.3%),优势菌群为拟盘多毛孢52株,其次为拟茎点霉36株,链格孢34株;而榧树中共分离到100株菌株(占总数的19.7%),优势菌群为镰孢霉22株,其次为拟茎点霉7株,拟盘多毛孢3株。②从两种植物的针叶中分离到144株菌株(占总数的28.4%),优势菌群为拟盘多毛孢15株(占总数10.4%),其次为炭疽菌14株(占总数9.7%),茎点霉10株(占6.9%);茎中共分离到310株(占总数的61.1%),优势菌群为拟盘多毛孢40株(占总数的12.9%),其次为拟茎点霉39株(占总数12.6%),镰孢霉34

论文目录

• 第一章 文献综述
• 1 植物内生真菌
• 1.1 植物内生真菌的涵义及其与植物的关系
• 1.2 植物内生真菌的分离
• 1.3 植物内生真菌的生物多样性
• 2 内生真菌及其次生代谢产物的研究
• 2.1 抗肿瘤活性研究
• 2.2 抗菌活性研究
• 2.3 抗病毒活性研究
• 2.4 抗虫活性研究
• 2.5 其它
• 3 植物内生真菌的分类鉴定概述
• 3.1 传统的分类鉴定方法
• 3.2 分子系统学鉴定方法
• 4 与本实验有关的几种植物简介
• 4.1 红豆杉
• 4.2 榧树
• 5 植物内生真菌活性菌株的筛选方法
• 5.1 抗菌活性菌株的筛选
• 5.2 抗肿瘤活性菌株的筛选
• 6 本研究的目的和意义
• 第二章 植物内生真菌的分离鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 培养基
• 1.2 试剂
• 1.3 实验器材
• 1.4 样品采集
• 1.5 内生真菌分离纯化
• 1.6 内生真菌的保藏
• 1.7 内生真菌的鉴定
• 2 结果
• 2.1 内生真菌的分离鉴定结果
• 2.2 内生真菌的菌落照片与显微照片
• 3 分析与讨论
• 3.1 内生真菌的分离
• 3.2 内生真菌纯化与培养
• 3.3 内生真菌的生物多样性
• 第三章 植物内生真菌中抗真菌活性菌株的筛选
• 1 材料和方法
• 1.1 培养基
• 1.2 供试菌株
• 1.3 试剂与器材
• 1.4 菌株的发酵培养与样品制备
• 1.5 抗真菌活性菌株的筛选
• 2 结果
• 3 分析与讨论
• 3.1 菌株发酵样品的制备
• 3.2 活性菌株的筛选
• 第四章 菌株 F0028的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 肿瘤细胞株与植物病原菌
• 1.2 培养基
• 1.3 方法
• 2 结果
• 2.1 菌株 F0028发酵条件研究
• 2.2 菌株 F0028对其它7种植物病原菌活性
• 2.3 菌株 F0028对三种肿瘤细胞的活性
• 2.4 发酵液活性物质对热稳定性
• 2.5 发酵液活性物质对酸碱稳定性
• 2.6 发酵液组分的分离与活性测定结果
• 2.7 菌株 F0028分类鉴定
• 3 分析与讨论
• 参考文献