压应力对体外培养软骨细胞凋亡和增殖的影响

论文摘要

目的:研究静态压力对体外培养的软骨细胞凋亡和增殖的影响及TNF-α、IL-1β变化与细胞凋亡的关系,为软骨细胞增殖寻找有效途径。方法:将兔膝关节软骨细胞进行分离培养扩增,将第3代软骨细胞分别放在压力为0kp、20kp、40kp、70kp的压力培养箱中培养0h、4h、16h、24h,流式细胞仪测定软骨细胞凋亡值,免疫组化法检测软骨细胞增殖细胞核抗原（proliferation cell neclear antigen,PCNA）作为软骨细胞增殖指标,并测定相应细胞培养基中TNF-α、IL-1β的含量。结果:软骨细胞受到外界压力作用后,细胞凋亡值均出现不同程度的提高,在20kp时,软骨细胞凋亡随着作用时间延长逐渐下降;在40kp时,软骨细胞凋亡明显增加,与对照组（0kp）比较有统计学意义（ p<0.05 ）,但随时间变化细胞凋亡值变化差异不明显（ p>0.05 ）;70kp时,软骨细胞凋亡值随时间延长明显增加（ p<0.05 ）。PCNA的表达在20kp、40kp时出现先抑制（与0kp比较, p<0.05 ）,而后逐渐增长在24h后超过对照组;在70kp时,PCNA表达4h明显增加（ p<0.01 ）,在24h后低于对照组（0kp）。TNF-α含量采用可重复双因素分析,时间因素F=33.16,P<0.01,压力因素=5.99,P<0.01,时间和压力的交互作用F=6.89,P<0.01。在20kp时,TNF-α的变化没有明显的规律,但与对照组（0kp）有一定程度增加（ p<0.05 ）,在40kp和70kp下,TNF-α的变化随着时间的延长逐渐增加而且差别有明显统计学意义（P<0.01）;IL-1β的变化采用可重复双因素分析,其中时间F=12.23,P<0.01,压力F=3.21 ,P>0.05,时间与压力的交互作用F=5.80,P<0.01;在70kp的时候,随着时间的延长,IL-1β逐渐下降,和对照组（0kp）比较有显著差异（ p<0.01）。结论:体外培养的软骨细胞的凋亡和增殖与时间、压力有明显的相关性,长时间的高压力作用使软骨细胞凋亡增加,增殖减少导致软骨细胞数量减少,一定作用时间的低压力作用细胞凋亡减少,增殖增加使细胞数量增加;软骨细胞的凋亡和增殖与TNF-α、IL-1β变化有一定的相关性,在高压力的时候比较明显;采用适当的压力、一定的时间、适当的细胞因子作用于软骨细胞有助于软骨细胞体外扩增。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 细胞因子与软骨缺损治疗进展
• 攻读学位期间公开发表的文章
• 致谢