论文摘要
目的:AP-2(activator protein-2)是一类重要的转录因子家族,与肿瘤发生发展密切相关。AP-2家族分子在胃癌中的表达以及与胃癌增殖、侵袭和转移等生物学行为的关系目前尚不清楚。本研究通过检测AP-2在胃癌组织中的表达,探讨AP-2分子表达与胃癌临床进展是否具有相关性;并研究DADS对人胃癌MGC803细胞AP-2表达的影响。方法:1.组织芯片检测胃癌组织中AP-2α, AP-2β和AP-2γ的表达,观察AP2表达与胃癌分化程度、转移以及临床分期的关系;2. Western-Blot, RT-PCR、免疫细胞化学分析DADS对人胃癌MGC803细胞AP-2α, AP-2β和AP-2γ表达的影响。结果:1.组织芯片结果显示:AP-2α, AP-2β和AP-2γ蛋白在胃癌中的表达主要分布在细胞质中。AP-2α、AP-2β和AP-2γ在胃癌中的表达高于正常胃粘膜组织,正常胃粘膜组织与癌旁组织、胃癌组织相比,差异有统计学意义(P<0.05),且三者在胃癌组织中的表达水平与胃癌淋巴结转移相关(P<0.05)。2. RT-PCR显示,10mg·L-1、20mg·L-1、30mg·L-1DADS处理MGC803细胞后和30mg·L-1DADS处理MGC803细胞4h、12h、24h后,与对照组相比,AP-2α、β、γ以及相关基因MMP-9、VEGF、EGFR、MMP-2、MMP-7mRNA水平无明显下降(P<0.05)。3. Western-Blot显示,30mg· L-1DADS作用MGC803细胞4h、12h、24h后,AP-2α、AP-2β和AP-2γ总蛋白表达水平无显著差异,而AP-2α、AP-2β和AP-2γ核蛋白水平随时间增加逐渐降低(P<0.05),表明DADS能呈时间依赖性下调MGC803细胞AP-2α、AP-2β和AP-2γ核蛋白的表达(P<0.05)。4.免疫细胞化学结果显示,30mg· L-1DADS作用MGC803细胞24h后,AP-2α、AP-2β和AP-2γ表达细胞浆和细胞核表达均下调,表明DADS对人胃癌细胞AP-2的表达具有明显抑制作用。结论:1.在胃癌组织中AP-2α、AP-2β和AP-2γ的表达水平与胃癌淋巴结转移相关。2. DADS能下调胃癌细胞核中AP-2α、AP-2β和AP-2γ的表达。
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