复合氨基酸和复合维生素功能口服液的研究

论文摘要

氨基酸是人体生命活动所必需的基本物质,能构成蛋白质的氨基酸有20多种,其中8种氨基酸在体内不能合成,必须从食物中补充。氨基酸的生理功效主要有:生成能量,促进蛋白质合成,促进胶原合成,促进生长激素分泌,提高免疫功能,美肤美容等等。维生素是维持人体和动物体正常生理功能所必需的一类低分子有机化合物,人及动物对维生素的需求虽然不大,其作用却非常显著。由于人和动物体内均不能合成维生素,必须依赖食物和饲料来提供足够的维生素。当机体从外界摄取的维生素不能满足其生命活动的需要时,就会引起新陈代谢功能的紊乱,导致生病,甚至死亡。本课题主要内容包含复合氨基酸功能口服液的研究和复合维生素功能口服液的研究。本文的工作主要包括以下四个部分:第一部分:复合氨基酸口服液HPLC分析方法的建立采用Agilent 1100高效液相色谱系统:VWD紫外检测器,G1354A型泵（美国Agilent公司）;色谱柱:DiamonsilTMC18柱（250×4.6 mm,5μm）;C18预柱（10×4.6mm,5μm）;流动相:A相为0.1 mol·L-1乙酸钠水溶液;B相为乙腈;流速:1.0mL·min-1;柱温:40℃;检测波长:254 nm;进样量:20μL;采用PITC作为柱前衍生试剂,衍生后样品经0.1 mol·L-1乙酸钠水溶液和乙腈梯度洗脱后检测。试验结果显示43 min内16种氨基酸实现良好的分离;在一定范围内,16种氨基酸的线性良好,相关系数R为0.9996-0.9999;日内精密度RSD不超过1.87%,日间精密度RSD不超过1.89%;16种氨基酸的检测限为0.61-2.50 ng,表明了方法的灵敏度很高;16种氨基酸的回收率为95.97%-103.99%;并且样品稳定性好以及样品测定结果良好。表明所建立的HPLC法快速准确、灵敏简便,专属性强,简便而且实用。第二部分:复合氨基酸口服液的制备以及稳定性考察制备了含16种氨基酸的功能性口服液,其中包含8种人体必需氨基酸。对该口服液制剂进行120℃高温灭菌20 min;考察60℃高温影响因素试验和4500lx±500lx照度的强光影响因素试验对氨基酸口服液的稳定性重点考察项目的影响;按稳定性重点考察项目对口服液40℃高温加速试验考察6个月,同时进行了长期试验。试验结果表明本口服液可经120℃高温高压灭菌20 min,60℃高温影响因素试验表明氨基酸口服液样品在高温60℃放置10 d之后氨基酸口服液的稳定性重点考察项目:溶液的颜色、气味、口感、pH值、澄清度、含量等项目都基本保持不变。4500lx±500lx的照度的强光影响因素试验表明氨基酸口服液样品在强光放置10 d之后氨基酸口服液的稳定性重点考察项目:溶液的颜色、气味、口感、pH值、澄清度、含量等项目都基本保持不变。高温加速试验表明本口服液能在40℃条件下稳定放置6个月。长期表明本口服液能在25℃条件下稳定放置6个月（目前做到6个月数据）。说明了本口服液的良好稳定性。第三部分:复合维生素口服液HPLC分析方法的建立采用RP-HPLC法,选择两种色谱条件分别对2种脂溶性维生素（VA和VE,色谱条件2）和四种水溶性维生素(用于检测VB1,VC,VB6和Vpp,色谱条件1)进行了检测。色谱条件1(用于检测VB1,VC,VB6和Vpp):Agilent 1100高效液相色谱系统:VWD紫外检测器,G1354A型泵（美国Agilent公司）;预柱C18（10mm×4.6 mm,5μm）;色谱柱DiamonsilTMC18柱（250 mm×4.6 mm,5μm,迪马科技有限公司）;流动相为甲醇-0.05 moL·L-1KH2PO4（含0.3%三乙胺,调PH至6.0）（7:93）;流速为1.0 mL·min-1;柱温为25℃;检测波长266 nm;进样量为20μL。色谱条件2（用于检测VA和VE）:Agilent 1100高效液相色谱系统:VWD紫外检测器,G1354A型泵（美国Agilent公司）;预柱C18（10 mm×4.6 mm,5μm）;色谱柱DiamonsilTMC18柱（150 mm×4.6 mm,5μm,迪马科技有限公司）;流动相为甲醇一水（98:2）;流速为1.0 mL·min-1;柱温为25℃;检测波长0 min时为325 nm,10 min时为280 nm;进样量为20μL。试验结果显示在色谱条件1下VB1,VC,VB6和Vpp在15 min内实现良好的分离,在色谱条件2下VA和VE在23 min内实现良好的分离;在一定的范围内,6种维生素的线性良好,相关系数R为0.9997-0.9999;6种维生素日内精密度RSD不超过1.55%,日间精密度RSD不超1.75%,表明了良好的精密度;6种维生素的检测限为0.08-0.68 ng,表明了方法的灵敏度很高;回收率试验显示6种维生素的回收率为95.30%-102.52%;并且样品稳定性好以及样品测定结果良好。本方法灵敏度和精密度高,线性关系和回收率良好,简便而且实用。第四部分:维生素A,E纳米乳制备和考察以Tween-80为乳化剂,Gly为助乳化剂,Tween-80与Gly按4:1搅拌混匀为混合乳化剂;取混合乳化剂:混合维生素油=7:1,（维生素混合油为VA:VE=1:3,m/m）,在25℃恒温磁力搅拌条件下制备了VA和VE纳米乳。并对纳米乳进行了物理和化学稳定性的初步考察。试验结果显示制备的VA和VE纳米乳粒径很小,约15 nm,并且分布窄,Zeta电位为-20.9±1.6 mV。120℃加热对纳米乳中VA破坏极其严重,表明维生素口服液不能用加热的方式灭菌。60℃、40℃、30℃的影响因素试验表明30℃以上的温度对VA破坏严重,但VE在不同的温度下均保持稳定;25℃条件下放置10 d后VA含量约为0 d的98.94%,VE的含量是0 d的101.65%,表明25℃条件下VA和VE的稳定性较好。强光影响因素试验表明纳米乳中的VA在4500lx±500lx的照度条件下放置10 d后约有10%被破坏,而VE的含量基本不变。表明制备的纳米乳物理稳定性好,但化学稳定性较差。纳米乳制剂必须采取良好的避光措施,放置温度不可高于25℃。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 一、氨基酸和维生素的作用
• 二、功能口服液（饮品）的研究状况
• 三、市场分析
• 四、课题的提出
• 参考文献
• 第一章 复合氨基酸口服液中16种氨基酸HPLC分析方法的建立
• 1 仪器与试药
• 1.1 仪器
• 1.2 试药
• 2 方法与结果
• 2.1 色谱条件
• 2.2 对照品氨基酸混合储备液
• 2.3 标准系列氨基酸混合液
• 2.4 供试品溶液的制备
• 2.5 衍生试剂的制备和氨基酸衍生方法
• 2.6 线性关系考察
• 2.7 精密度与检测限试验
• 2.8 回收率试验
• 2.9 稳定性试验
• 2.10 样品测定
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二章 复合氨基酸口服液的制备以及稳定性考察
• 1 仪器与试药
• 1.1 仪器
• 1.2 试药
• 2 方法与结果
• 2.1 色谱条件
• 2.2 氨基酸酸口服液的制备
• 2.3 稳定性重点考察项目
• 2.4 高温（120℃）高压灭菌对氨基酸口服液的影响
• 2.5 氨基酸口服液的影响因素试验
• 2.6 氨基酸口服液的高温加速试验
• 2.7 氨基酸口服液的长期试验
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 复合维生素口服液HPLC分析方法的建立
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 药品与试剂
• 2 方法与结果
• 2.1 色谱条件
• 2.2 溶液的制备
• 2.3 线性关系考察
• 2.4 精密度与重复性实验
• 2.5 回收率试验
• 2.6 检测限
• 2.7 方法专属性考察
• 2.8 样品稳定性试验
• 2.9 样品测定
• 3 讨论
• 4 小结
• 第四章 维生素A和E纳米乳的制备和考察
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 药品与试剂
• 2 方法与结果
• 2.1 纳米乳处方筛选
• 2.2 色谱条件
• A和V_E纳米乳的制备方法'>2.3 V_A和V_E纳米乳的制备方法
• 2.4 纳米乳的粒径和Zeta电位的测量以及稀释对粒径的影响
• A和V_E含量的影响'>2.5 120℃加热对纳米乳中V_A和V_E含量的影响
• 2.6 纳米乳影响因素实验
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 全文总结
• 作者简介
• 参考文献
• 复合维生素检测方法的研究进展（综述）