山羊胚胎分割试验研究

论文摘要

本试验对山羊胚胎分割技术的各个环节及其影响因素进行了较系统的研究。 试验一 对供体山羊超排处理并于配种后第5.5-6.5天采卵,将所得的可用胚分为育成羊桑葚胚、育成羊囊胚、经产羊桑葚胚和经产羊囊胚四个试验组。分别在0.2M蔗糖PBS液中显微二分割胚胎,将半胚培养18小时后记录囊胚发育率和囊胚细胞数。结果表明,育成羊组的可用胚率高于经产羊组,差异不显著（88.9%vs73.8%,P>0.05）:四个试验组组间胚胎分割成功率（P>0.05）和囊胚细胞数（P>0.05）差异皆不显著;育成羊组（含桑葚胚、囊胚）分割胚的囊胚发育率都高于经产羊组,但差异不显著（68.8%vs68.2%、85.7%vs81.8%,P>0.05）。 试验二 1.超排供体山羊（经产）并于配种后第5.5-6.5天回收胚胎,受体作同期发情处理。2.在PBS液、0.2M蔗糖PBS液两种分割液中显微二分割部分桑葚胚和囊胚并将分割成功的半胚培养18小时后记录囊胚发育率和囊胚细胞数。结果表明,0.2molS+PBS分割液组（含桑葚胚、囊胚）的二分胚囊胚发育率高于PBS分割液组,但差异不显著（68.2%vs58.3%、81.8%vs80.0%,P>0.05）;分割成功率（P>0.05）和囊胚细胞数（P>0.05）高于PBS分割液组,差异也不显著。3.在0.2M蔗糖PBS液中分别用显微分割桑葚胚、显微分割囊胚、机械辅助分割桑葚胚、机械辅助分割囊胚、徒手分割桑葚胚、徒手分割囊胚6个试验组分割所获可用胚。并将部分分割成功半胚培养18小时后记录囊胚发育率和囊胚细胞数;另一部分直接移植。结果表明,在0.2molS+PBS分割液中,分割桑葚胚时,显微分割组的囊胚发育率显著高于徒手分割组（68.2%vs22.2%,P>0.05）,显微分割组和机械辅助分割组之间差异不显著（P>0.05）;显微分割组和机械辅助分割组的妊娠率都高于徒手分割组（33.3%、33.3%vsO%,P>0.05）。分割囊胚时,不同分割方法的三个试验组之间囊胚发育率差异不显著（P>0.05）;机械辅助分割组的妊娠率高于显微分割组和徒手分割组,差异不显著（66.7%vs 33.3%、33.3%,P>0.05）。6个试验组之间,胚胎分割成功率和囊胚细胞数差异皆不显著（P>0.05）。4.在0.2molS+PBS分割液中用机械辅助分割法连续分割、间断分割部分桑葚胚和囊胚。并将其所分割的四分胚培养18小时后记录四分胚囊胚发育率及囊胚细胞数。结果表明,间断分割囊胚时的四分割成功率高于其他三个试验组（87.5%vs50.0%,P<0.05;87.5%vs 62.5%,P>0.05:87.5%vs 71.4%P>0.05）。间断分割囊胚时的四分胚囊胚发育率也高于其他三个试验组,差异不显著（71.4%vs50.0%、53.3%、55.0%,P>0.05）。 结论:1.育成山羊可以做胚胎分割的供体,而且超排所获胚胎的二分割成功率和半胚发育率都高于经产羊组（P>0.05）。2.在生产条件下,桑葚胚和囊

论文目录

• 文献综述
• 一、胚胎分割技术的研究进展
• 二、胚胎分割原理
• 三、胚胎分割技术的应用
• 四、胚胎分割的方法
• 五、分割胚的发育
• 六、胚胎分割技术的研究热点
• 七、试验设想及试验意义
• 山羊胚胎分割、移植试验研究
• 一、引言
• 二、材料
• 1. 试验地点
• 2. 试验动物
• 3. 主要仪器与设备
• 4. 主要试剂、溶液及配制
• 三、方法
• 1. 供、受体的处理
• 2. 胚胎采集和鉴定
• 3. 显微操作仪的准备
• 4. 胚胎分割
• 5. 分割胚培养
• 6. 半胚移植
• 7. 移植胚胎受体的管理及妊娠诊断
• 8. 数据处理
• 四、结果
• 1. 育成羊和经产羊胚胎二分割成功率的比较
• 2. 不同分割液对二分胚发育的影响
• 3. 相同分割液中不同分割方法对二分胚发育的影响
• 4. 不同分割方法与胚胎四分割成功率的关系
• 五、分析及讨论
• 1. 育成羊和经产羊胚胎二分割的效果比较
• 2. 不同分割液与二分胚发育的关系
• 3. 不同分割方法与二分胚发育的关系
• 4. 分割不同时期胚胎与二分胚发育的关系
• 5. 不同分割程序与胚胎四分割成功率的关系
• 6. 关于分割胚囊胚发育率和细胞计数在胚胎分割方法研究中的应用
• 7. 对胚胎进行体外操作应注意的问题
• 六、结论
• 参考文献
• 致谢
• 附图