p38MAPK抑制剂CBS3830对糖尿病大鼠自体静脉移植内膜增生的影响及机制探讨

论文摘要

目的研究p38MAPK抑制剂CBS3830在糖尿病大鼠自体移植静脉中抗内膜增生的作用,从而探讨p38MAPK信号通路在静脉桥狭窄中的作用,为糖尿病患者桥血管再狭窄的预防及治疗提供新的途径。方法将30只SPF级SD雄性大鼠（6～8周龄,体重200～250g,）,随机分为假手术组（sham group, S）、对照组（control group,C ）、药物组（drug group,D）,每组10只。假手术组仅模拟手术过程,不进行血管移植和药物干预;另外两组首先采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病动物模型,然后再采用改良cuff法建立自体静脉移植模型,造模前1 h药物组经胃管灌入0.3 mg/ml的CBS3830 10ml/kg,对照组同法给予等体积的CBS3830溶媒1%甲基纤维素。分别于术前及术后1、3、7 d,采用ELSIA法检测大鼠血清中的TNF-α、IL-1β和AGEs;免疫组织化学染色检测各组大鼠血管标本中核转录因子kappa B（NF-κB）的表达;于第7天处死动物并获取移植静脉标本,HE染色法观察大鼠移植静脉内膜病理变化。蛋白印迹技术（western blotting）测定p38、P-p38、β-actin的表达。结果药物组TNF-α在0-3d呈上升趋势,第3d时水平达到最高,与对照组相比无明显差别,此后表达水平逐渐下降,至第7d时降到最低,明显低于对照组,有显著性差异（p<0.05）。药物组IL-1β水平在1d时最高,此后表达水平逐渐下降,至第7d时明显低于对照组（p<0.01）。药物组、对照组的AGEs含量均较假手术组明显增加,两组间无明显差异。HE示药物组内膜增生明显低于对照组,差异具有统计学意义（p<0.05）;免疫组化显示术后第7天大鼠血管标本中NF-κB的表达药物组亦明显低于对照组。Western blotting检测示p38及P-p38的产物示药物组明显低于对照组,有显著统计学差异。结论p38MAPK抑制剂CBS3830在糖尿病大鼠自体静脉移植中具有明显的抗炎及抗内膜增生作用,说明p38MAPK通路参与了自体静脉移植血管桥再狭窄的重塑过程,是移植静脉血管重塑的关键环节,对其深入研究有望为糖尿病患者CABG术后静脉桥再狭窄的防治提供新的切入点。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 2 材料和方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 实验器材
• 2.1.4 其他器材
• 2.2 方法
• 2.2.1 实验分组
• 2.2.2 药物准备
• 2.2.3 给药时间及方式
• 2.2.4 模型制作
• 2.2.5 标本采集
• 2.2.6 指标测定
• 2.2.7 统计学分析
• 3 结果
• 3.1 各组大鼠手术情况及存活情况
• 3.2 各组血清 TNF-α细胞因子含量的变化情况
• 3.3 血清 IL-1β细胞因子含量的变化情况
• 3.4 血清AGEs 含量的变化情况
• 3.5 桥血管内膜、中膜的组织病理学变化
• 3.6 核转录因子-KB 的表达
• 3.7 Western blotting 检测p38 及P-p38 的产物表达
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 个人简历
• 致谢
• 综述
• 参考文献