临床分离大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶菌株及耐药性检测和SHV型β-内酰胺酶研究

论文摘要

第一部分安徽省部分地区临床分离大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶菌株及耐药性检测研究背景:超广谱β-内酰胺类抗生素（如:头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、头孢泊肟）引入临床应用后不久,德国就在1983年就首次报道分离出SHV-2型超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）,随后,世界各地不断有新的ESBLs检出（具体种类、氨基酸位点改变及等电点见http://www.lahey.org/studies/webt.htm）。超广谱β-内酰胺酶是由质粒介导的水解多种β-内酰胺类抗生素的一类酶。它主要由革兰阴性杆菌产生能使氧亚氨基（anoxyimino group）β-内酰胺类抗生素（如第三代头孢菌素,氨曲南）失活。产ESBLs的菌株耐药问题已经成为当前全球最重要的医院内耐药问题之一。自从ESBLs被报道以来,在世界各地引起了广泛传播流行。其部分原因是因为缺少可靠的检测方法,人们往往是在第三代头孢菌素治疗失败后,才意识到可能有ESBLs细菌的存在。早期检测ESBLs对控制其流行和传播尤为重要。而且,由于各地区流行的基因型不同而存在耐药性和检测底物的地区差别。因此了解大肠埃希菌的最佳检测底物及耐药性特点,有利于防止产ESBLs菌株的广泛区域性流行,并指导临床治疗,以免延误病情和造成浪费。鉴于安徽省尚无大范围的调查研究资料,我们对安徽省部分地区（20多家）医院临床标本中分离的大肠埃希菌的耐药性及ESBLs的产生情况进行了研究。目的:了解安徽省部分地区临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株及耐药性。方法:收集安徽省部分地区临床分离的大肠埃希菌361株。采用琼脂稀释法检测其对常用抗菌药物的耐药性。CLSI确证试验（纸片增强法）检测出产ESBLs菌株。结果:大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为33.8%,产ESBLs菌株显示多重耐药,对头孢噻肟、氨苄西林、头孢呋辛、头孢唑林、左氧氟沙星及环丙沙星等多种抗生素的耐药率高于非产酶株。结论:本地区大肠埃希菌中,ESBLs菌株的检出率高,产ESBLs菌株多重耐药显著,临床应加强检测和监测。第二部分临床分离大肠埃希菌中SHV型β-内酰胺酶研究研究背景:由质粒介导的超广谱β-内酰胺酶自1983年在德国首次报道以来,全世界许多地方不断有新的ESBLs检出,该类酶主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌产生,各国各地区流行的型别各不相同。由ESBLs菌株引起的感染发病率也在逐年升高,在某些医院甚至出现爆发流行。产ESBLs的菌株耐药问题是当前全球最重要的医院内耐药问题之一。产生SHV型酶的ESBLs菌株目前已经在世界各地被发现,包括欧洲、南美、中东和远东地区,国内也有报道。但是由于个国家和地区的用药习惯不一样,导致各地区流行的基因型也不一致。因此,了解产ESBLs菌株的最佳检测底物、耐药性特点及其基因型分布特征,有利于防止产ESBLs菌株的区域性流行,并指导临床合理的治疗,以免延误病情和造成不必要的浪费。鉴于国内目前使用三代头孢较为广泛,导致SHV型ESBLs菌株较为流行的现状,我们对安徽省部分医院（20家）分离的大肠埃希菌进行了耐药基因的分子生物学研究。目的:了解安徽省安徽省部分医院临床分离产ESBLs大肠埃希菌中SHV型β-内酰胺酶的基因型别及分子流行病学特征。方法:PCR和DNA序列分析确定SHV型β-内酰胺酶的基因型别;ERIC-PCR检测产SHV型β-内酰胺酶菌株同源性。结果:122株产ESBLs大肠埃希菌中,4株SHV型β-内酰胺酶基因阳性（3.3%）,ERIC-PCR谱型不同;测序结果显示,SHV-1型3株,SHV-5型1株结论:安徽省部分医院临床分离产ESBLs大肠埃希菌中,存在SHV-1和SHV-5（ESBLs）,产酶菌株间未发现克隆传播现象。

论文目录

• 中英文缩略词表
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• 第一部分:安徽省部分地区临床分离大肠埃希茵中产超广谱β-内酰胺酶菌株及耐药性检测
• 1 前言
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 第二部分:临床分离大肠埃希茵中SHV型β-内酰胺酶研究
• 1 前言
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献:
• 附录1 个人简介
• 附录2 工作期间研究成果
• 致谢
• 综述