论文摘要
目的:大约三分之一的癫痫患者对药物治疗不敏感其原因主要是脑组织的血脑屏障的内皮细胞和星型胶质细胞上表达的多重耐药蛋白(multi-drug resistance protein,MDR)的作用,是MDR将进入细胞的抗癫痫药物在ATP的作用下,把细胞内的抗癫痫药物泵出细胞而使细胞内的药物浓度下降,而抗癫痫治疗失败。PGP(P-Glycoprotein)是MDR蛋白家族中的重要一员。而RNA干扰(RNA interfering,RNAi)是新近发现的一种通过小分子量的RNA与相应的mRNA相结合,并将其剪切成碎片,而终止DNA向蛋白表达的一种现象。通过RNAi方法抑制PGP的表达以改善癫痫多重耐药现象,而寻求耐药癫痫的治疗的途径。 材料与方法:通过设计三对能够表达小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)的DNA序列,构建含有相应DNA序列的p-SIREN shuttle质粒,将其转染通过马桑内酯诱导的已表达多重耐药蛋白的神经胶质细胞,通过逆转录PCR(RT-PCR)法测定其表达PGP蛋白的mRNA的量,来判断所设计的DNA序列对于PGP蛋白表达抑制的作用。 结果:我们所设计的三条DNA序列之中,都有抑制PGP表达的作用,尤其是第1条作用最为显著。
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