超声对鸡腿菇多糖结构和活性影响机理及构效关系研究

论文摘要

应用超声波技术提取鸡腿菇多糖,气相色谱仪、高效液相色谱仪、气质联用仪以及原子力显微镜等先进仪器测定其一级及高级结构,研究超声提取技术对多糖结构和生物活性的影响,探讨结构和生物活性的关系,主要研究内容及结果为：（1）对热水提取鸡腿菇多糖WCP和超声辐射提取鸡腿菇多糖UCP的体外抗氧化能力进行了比较,结果表明：两种提取方法所得多糖溶液WCP和UCP均具有一定的体外抗氧化能力,且超声辐射提取法所得UCP的抗氧化能力明显优于沸水浴法提取WCP。（2）通过HPLC、GC、GC-MS等技术鉴定了热水提取鸡腿菇多糖（WCP3a）和超声波提取鸡腿菇多糖（UCP3a）的结构。WCP3a的单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖三种,而UCP3a的单糖组成为甘露糖和葡萄糖两种；WCP3a的糖苷键型为1→4,6甘露糖、1→甘露糖、1→3葡萄糖和1→2,6半乳糖；UCP3a的糖苷键型为1→4,6甘露糖、1→甘露糖、1→3葡萄糖和1→4葡萄糖。（3）对比了WCP3a和UCP3a对超氧阴离子的清除作用,解析WCP3a和UCP3a的化学结构,探究多糖结构和活性的关系；设置不同的超声参量处理WCP3a,研究超声参量对多糖结构和活性的影响机理。首次发现超声波可引起化学键的断裂及原子重排,导致多糖的组成单位单糖结构发生变化-半乳糖转化为葡萄糖。（4）鸡腿菇多糖的活性与空间结构的关系研究中,刚果红实验和原子力显微镜技术检测结果表明,鸡腿菇多糖为单股螺旋结构；邻苯三酚自氧化法检测结果表明在试验浓度范围内,鸡腿菇多糖对超氧阴离子自由基有一定的清除作用；鸡腿菇多糖WCP3a的体外抗氧化活性与其空间结构关系密切。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 鸡腿菇研究进展
• 1.2 鸡腿菇多糖的提取
• 1.2.1 溶剂提取法
• 1.2.2 酶法
• 1.2.3 超滤法
• 1.2.4 超临界流体萃取法
• 1.2.5 微波辅助提取法
• 1.2.6 超声辅助提取法
• 1.3 鸡腿菇多糖分离纯化
• 1.4 鸡腿菇多糖结构鉴定
• 1.4.1 化学方法
• 1.4.2 物理方法
• 1.5 鸡腿菇多糖药理活性
• 1.5.1 增强机体免疫
• 1.5.2 抗肿瘤活性
• 1.5.3 抗氧化活性
• 1.5.4 降血糖降血脂
• 1.6 鸡腿菇多糖构效关系研究进展
• 1.7 本论文的研究意义
• 第2章 超声波辐射提取鸡腿菇多糖的可行性研究
• 2.1 材料与仪器
• 2.1.1 材料与试剂
• 2.1.2 仪器设备
• 2.2 试验与方法
• 2.2.1 鸡腿菇多糖的提取
• 2.2.2 鸡腿菇多糖的总还原能力测定
• 2.2.3 超氧阴离子自由基清除能力测定
• 2.2.4 1,1-二苯基-2-苦苯肼（DPPH）自由基清除能力测定
• 2.2.5 抑制脂质过氧化能力测定
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 鸡腿菇多糖的总还原能力测定结果分析
• 2.3.2 清除超氧阴离子自由基能力测定结果分析
• 2.3.3 清除DPPH自由基能力测定结果分析
• 2.3.4 抑制脂质过氧化能力测定结果分析
• 2.4 结论
• 第3章 鸡腿菇多糖的分离纯化及纯度鉴定
• 3.1 材料与仪器
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 仪器设备
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 季铵盐沉淀法分级分离鸡腿菇粗多糖
• 3.2.2 鸡腿菇粗多糖Sephadex G-200柱层析
• 3.2.3 鸡腿菇多糖的纯度鉴定
• 3.2.4 鸡腿菇多糖的理化性质检测
• 3.3 结果分析
• 3.3.1 鸡腿菇粗多糖Sephadex G-200柱层析结果
• 3.3.2 鸡腿菇多糖的纯度鉴定结果
• 3.3.3 鸡腿菇多糖WCP3a和UCP3a的理化性质检测
• 3.3.4 鸡腿菇多糖WCP3a和UCP3a的总糖含量测定结果
• 第4章 超声提取对鸡腿菇多糖一级结构的影响
• 4.1 材料仪器
• 4.1.1 材料与试剂
• 4.1.2 仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 WCP3a和UCP3a的分子量测定
• 4.2.2 超声处理对鸡腿菇多糖中单糖组成的影响
• 4.2.3 超声处理对鸡腿菇多糖链结构的影响
• 4.2.4 鸡腿菇多糖的高碘酸氧化-Sminth降解分析
• 4.2.5 超声处理对鸡腿菇多糖糖苷键型的影响
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 鸡腿菇多糖WCP3a和UCP3a单糖组成分析结果
• 4.3.2 超声处理对鸡腿菇多糖分子量的影响结果
• 4.3.3 超声处理对鸡腿菇多糖链结构的影响结果
• 4.3.4 鸡腿菇多糖的高碘酸氧化-Smith降解分析结果
• 4.3.5 超声处理对鸡腿菇多糖糖苷键型的影响结果
• 4.4 结论
• 第5章 超声影响鸡腿菇多糖结构和活性的机理探究
• 5.1 材料与仪器
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 仪器设备
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 超声处理对鸡腿菇多糖生物活性的影响
• 5.2.2 超声参量对半乳糖结构的影响
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 超声处理对鸡腿菇多糖生物活性的影响结果
• 5.3.2 超声波处理半乳糖标准品的试验结果
• 5.4 结论
• 第6章 鸡腿菇多糖WCP3a的抗氧化活性与空间结构的关系研究
• 6.1 材料与仪器
• 6.1.1 材料
• 6.1.2 仪器
• 6.2 方法
• 6.2.1 WCP3a的刚果红实验
• 6.2.2 不同浓度NaOH处理WCP3a
• 6.2.3 WCP3a,WCP3a-0.2和WCP3a-0.4清除超氧阴离子自由基能力检测
• 6.2.4 WCP3a,WCP3a-0.2和WCP3a-0.4的原子力显微镜观测
• 6.3 结果和讨论
• 6.3.1 WCP3a的空间结构检测
• 6.3.2 WCP3a清除超氧阴离子自由基能力测定结果
• 6.3.3 鸡腿菇多糖WCP3a清除超氧阴离子自由基活性与空间结构的关系
• 6.4 结论
• 第7章 结论和展望
• 一 结论
• 二 展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间科研成果