P2X2受体在慢传输型便秘大鼠模型结肠中的表达及意义

论文摘要

背景：便秘是多种疾病的病理过程引起的一种复杂的症状。目前临床上通常将便秘分为3类:①慢传输型便秘；②出口梗阻型便秘；③混合型便秘。慢传输型便秘（slow transit constipation, STC）是一类胃肠道传输功能障碍的顽固性便秘，以结肠传输减慢为特点。其主要表现为大便次数减少、无便意及排便困难，是功能性便秘中较常见的类型。随着现代生活节奏加快,生活水平提高,饮食结构改变, STC发病率逐年上升,已经成为影响现代人们生活质量的常见疾病之一。人们很早就对其病因展开研究,但是因为STC的发生受多种因素影响,其病因非常复杂,所以迄今为止对慢传输型便秘患者肠动力损害的病因及发病机制尚未明确。近年来的研究显示肠神经系统、肠神经递质、胃肠激素、Cajal间质细胞等与STC发病相关。此外，有学者发现便秘有家庭聚集现象,因此认为遗传因素在STC的病因学上也有一定的作用。P2X2受体是近年发现的一种ATP门控的离子通道型受体，其广泛分布于全身各种组织，包括神经元、神经胶质细胞、免疫细胞,以及心脏、血管、呼吸系统、胃肠道、泌尿生殖系统的平滑肌细胞，在这些组织中发挥着不同的生物学功能。已有研究表明P2X2受体在大鼠逼尿肌组织中表达，对逼尿肌舒缩功能的调节发挥重要的作用。此外，在大鼠Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICC）细胞中也有P2X2的表达，提示P2X2介导的嘌呤能信号对ICC细胞功能有影响。有关P2X2受体在胃肠道中的研究表明其表达于肠道上皮细胞和胃肠道肠神经系统的肌间神经节中，并发现P2X2参与了快兴奋性突触后电位的形成，从而调节平滑肌的收缩和舒张功能，影响肠道的蠕动。由此可见，P2X2受体与肠道平滑肌的功能以及肠神经系统神经递质的释放有着的密切的联系，但P2X2受体在STC发生发展中的作用目前尚未见报道。目的：通过大黄灌胃的方法建立慢传输型便秘大鼠模型，研究P2X2受体在正常大鼠和慢传输型便秘大鼠模型结肠中的表达，探讨P2X2受体与慢传输型便秘发病的相关性。方法：1.建立慢传输型便秘大鼠模型。实验随机分为两组，对照组（n=15）大鼠饲以普通软饲料，造模组（n=15）给予生大黄溶液灌胃,开始用100mg/（kg d），以后每日在前日的基础上加倍,直到出现半数致泻，保持此剂量到80%的稀便消失，然后再在此基础上加倍给药,最后用量为3200mg/（kg d）,如此方法共饲养45d。观察大鼠每日粪便性状，并通过活性碳悬液推进试验，比较对照组和造模组肠道传输功能，以证实造模成功。2.大鼠造模成功后，脱臼处死大鼠，取距肛侧5cm结肠全层，制成石蜡标本及冻存新鲜组织，分别行荧光实时定量RT-PCR、免疫组化和Western blot蛋白印迹试验检测P2X2受体在正常大鼠和便秘大鼠模型结肠中的表达差异。结果：1．造模组粪便性状（Bristol分级1-2级）较对照组（Bristol分级4-5）干硬；大鼠肠道推进率：对照组为52.811.27％，造模组为39.903.01％，造模组大鼠肠道推进率均明显低于对照组（p<O．05）；该大鼠模型基本符合STC临床和病理生理特征。2．荧光实时定量RT-PCR结果显示P2X2受体在造模组结肠中的表达较对照组结肠中的表达减少；免疫组化结果显示在对照组和造模组结肠肌层和粘膜下丛均有P2X2受体表达；Western blot证实在造模组结肠中P2X2受体的表达较对照组结肠中P2X2受体表达减少。结论：1．大黄灌胃诱导的结肠慢传输型大鼠便秘模型粪便性状明显干硬，造模组肠道推进率较对照组明显减慢，基本符合慢传输型便秘临床特征。2．便秘大鼠模型结肠中P2X2受体的表达较对照组减少，提示P2X2受体表达减少可能是结肠慢传输运动的病因之一，P2X2受体与慢传输型便秘的发病具有一定的相关性。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1 大黄诱导慢传输型便秘大鼠模型的建立
• 一.材料
• 二.方法
• 三.统计学分析
• 四.结果
• 五.讨论
• 2受体在慢传输型便秘大鼠模型结肠中的表达及意义'>2 P2X₂受体在慢传输型便秘大鼠模型结肠中的表达及意义
• 一.材料和方法
• 二.结果
• 三.讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录 A 英中文术语缩略语对照表
• 附录 B 附图
• 附录 C 综述
• 参考文献